普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动力学研究

摘要

目的:
　　 1.建立普罗帕酮死后分布、死后弥散研究动物模型；建立保存检材中分解动力学研究(动物)模型。
　　 2.研究普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动力学规律，为普罗帕酮中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。
　　 方法:
　　 1.死后分布：9只家兔按8LD50剂量普罗帕酮(440mg/kg)灌胃染毒，待血压、呼吸和心电全部消失后，迅速提取心、肝、脾、肺、肾、脑、右下肢肌、心血、尿、胆汁、玻璃体液冷冻保存，高效液相色谱(HPLC)内标法定量检测普罗帕酮含量。
　　 2.死后弥散：家兔15只，随机分成5组。夹闭气管处死后1小时，按8LD50剂量普罗帕酮(440mg/kg)灌胃染毒，置于室温，分别于染毒后4h、8h、12h、18h、24h各随机解剖3只动物，取心血、胆汁、尿、玻璃体液、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、脑，置于-20℃冰箱内保存。HPLC法检测检材中普罗帕酮含量。
　　 3.保存检材中的分解动力学：6只犬按4LD50剂量灌胃。1小时后处死动物，分别提取心血和肝。每只犬心血和肝分三等份分别置于20℃、4℃、-20℃冰箱内保存；分别于0小时、24小时、72小时、5天、7天、30天、60天、120天、180天、240天、300天，采用HPLC法检测其中普罗帕酮含量；WinNorLin药代动力学软件处理保存检材平均药物浓度-时间数据，AIC信息判据判定动力学模型，计算消除动力学方程和参数。
　　 4.统计方法：实验所得数据用均数±标准差(x±s)表示，多样本均数比较采用方差分析，各组数据用SPSS11.5软件进行t检验。
　　 结果:
　　 1.死后分布染毒死亡家兔体内普罗帕酮含量由大到小依次为：胆汁(109.59±66.25μg/mL)＞肺(78.60±37.82μg/g)＞肝(47.11±53.90μg/g)＞肾(20.57±12.78μg/g)＞脾(20.09±15.02μg/g)＞尿(20.05±18.85μg/mL)＞心血(12.99±15.87μg/mL)＞心(7.47±10.63μg/g)＞脑(5.62±5.99μg/g)＞玻璃体液(2.10±3.51μg/mL)＞右下肢肌肉(1.96±1.61μg/g)。
　　 2.死后弥散家兔死后普罗帕酮染毒，除玻璃体液和脑在4小时未检出外，其他所取检材中均检出普罗帕酮。肝、脾、右肾、左肾、尿、肌肉(右下肢)中普罗帕酮含量在死后染毒12小时达高峰，继后下降；玻璃体液、胆汁、肺、脑、心、心血、胸肌中普罗帕酮含量在死后染毒18小时达高峰。其中胆汁、脑、心中普罗帕酮含量在死后染毒24小时内呈时间依赖性递增，而玻璃体液、肺、心血、胸肌中普罗帕酮含量在死后染毒18小时后呈下降趋势。死后染毒4-8小时内，家兔各组织(体液)中普罗帕酮最高浓度均较染毒致死家兔低(P＜0.05)；12-18小时内，脾、左肾、心、心血、肌肉和玻璃体中最高浓度均较染毒致死家兔高(P＜0.05)，而胆汁、肝、肺、脑、尿、肌肉中最高浓度均较染毒致死家兔低(P＜0.05)。
　　 3.保存检材中分解动力学不同温度保存犬血液和肝脏中普罗帕酮含量均下降。保存5天内血液和肝脏中普罗帕酮含量无显著性变化(P＞0.05)，20℃、4℃和-20℃保存7天后检材中普罗帕酮含量均呈时间依赖性递减，肝脏和血液中分别由0时的100％减至37.77±5.93％、38.63±8.65％、42.81±20.27％(P＜0.05)和22.39±10.25％、19.87±7.73％、34.11±8.18％(P＜0.05)。其分解动力学符合一级动力学过程二室开放模型，可用Ct=C0-αt+Cte-βt表示。20℃、4℃、-20℃保存肝脏中普罗帕酮的快速分解半衰期(t1/2α)分别为3.6d(α=0.1907)、2.2d(α=0.3223)、9.6d(α=0.9629)，而慢速分解半衰期(t1/2β)分别为186.6d(β=0.0037)、172.5d(β=0.0040)、287.5d(β=0.0024)；20℃、4℃、-20℃保存血液中普罗帕酮的快速分解半衰期(t1/2α)分别是2.5d(α=0.2763)、4.2d(α=0.1638)、10.7d(α=1.0228)，而慢速分解半衰期(t1/2β)分别是215.1d(β=0.0027)、242.1d(β=0.0024)、285.2d(β=0.0023)。根据Ct=C0-αt+Cte-βt方程计算的各样本中普罗帕酮含量理论值与实测值接近。
　　 结论:
　　 1.采用8LD50剂量(兔)、4LD50剂量(犬)普罗帕酮灌胃染毒，建立了普罗帕酮的死后分布、死后弥散、保存检材中分解动力学动物模型；建立了生物检材中普罗帕酮的高效液相色谱检测方法。可应用于普罗帕酮中毒(死)的法医学检验和法医毒物动力学研究。
　　 2.8LD50剂量普罗帕酮染毒致死家兔体内普罗帕酮含量由高到低依次为胆汁、肺、肝、脾、肾、尿、心血、心、脑、玻璃体、肌肉。其中胆汁、肺、肝中浓度最高，玻璃体和右下肢肌肉中含量最低。提示除血外，胆汁、肺、肝也可作为普罗帕酮中毒(死)案件法医学鉴定的毒物分析检材。
　　 3.普罗帕酮在家兔体内可发生死后弥散，仅死后染毒较短时间内玻璃体液和脑中未检出普罗帕酮；同剂量(8LD50)死后染毒家兔脾、左肾、心、心血、肌肉和玻璃体液中普罗帕酮最高浓度可高于灌胃染毒致死家兔。
　　 4.普罗帕酮在保存犬血液和肝脏中可发生分解。5天内保存检材中普罗帕酮含量相对稳定，7天后其含量呈时间依赖性递减，显著降低；低温保存可减慢其分解速度。普罗帕酮中毒(死)案件的法医学鉴定中，检材应在一周内送检和检测，若不能及时送检，应冷冻保存，并尽快检验。
　　 5.普罗帕酮在不同温度保存血和肝脏中分解符合一级动力学过程二室开放模型，在普罗帕酮中毒(死)案件法医学鉴定时，可采用Ct=C0-αt+Cte-βt公式和分解动力学参数推断检材中药物浓度，为普罗帕酮中毒(死)案件法医学鉴定提供科学依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分 普罗帕酮在家兔体内的死后分布研究

1.材料

2.方法

3.结果

第二部分 普罗帕酮在家兔体内的死后弥散研究

1.材料

2.方法

3.结果

第三部分 普罗帕酮在家犬保存检材中的分解动力学研究

1.材料

2.方法

3.结果

讨论

结论

参考文献

综述 Ic类抗心律失常药法医毒理学研究现状

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