两种槲寄生属植物指纹图谱研究

摘要

目的：
　　 研究两种槲寄生属植物的生药学特征及指纹图谱，并且对其粗提物抗肿瘤药效学进行初步研究。
　　 方法：
　　 实验一：按常规方法制取药材组织横切片及粉末片，进行形态学观察。
　　 实验二：采用薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)、随机扩增多态性DNA(RAPD)三种方法建立两种药材的指纹图谱。
　　 实验三：以人卵巢癌细胞系HO-8910、人胃癌细胞系SGC-7901及斑马鱼胚胎为实验对象，进行MTT及抑制肿瘤新生血管生成实验，初步研究两种药材50％甲醇粗提物抗肿瘤药效学。
　　 结果：
　　 实验一：通过组织横切片及粉末片可以区分开槲寄生的两个种：扁枝槲寄生和槲寄生。
　　 实验二：TLC指纹图谱表明，各样品均含有古柯二醇、β-香树脂醇和羽扇豆醇的混合物及齐墩果酸等斑点，展开剂甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.1)为最好；HPLC指纹图谱表明，梯度洗脱获得的两种槲寄生指纹图谱相似度均较高，分别大于0.7；RAPD指纹图谱表明，采用高盐-低pH法提取的组织DNA符合PCR的要求，扩增后跑胶，25个引物(S1-S25)中筛选出7个引物扩增出多态性条带。其中，引物S16对两种槲寄生均有较好的扩增效果。
　　 实验三：MTT实验结果表明，槲寄生药材对HO-8910及SGC-7901的IC50较大，分别为1.85-8.85 mg/mL、1.91-7.00 mg/mL，而扁枝槲寄生药材对两种细胞的IC50较小，分别为0.64-1.97mg/mL、0.38-1.25mg/mL；斑马鱼实验结果表明，不同产地的槲寄生药材在100μg/mL和10μg/mL下均无抑瘤活性，而扁枝槲寄生药材在100μg/mL和10μg/mL浓度下抑制率分别为41.9-100％、28.5-35.87％，抑制作用较大。
　　 结论：
　　 实验对两种槲寄生属药材进行了生药学研究，并建立了TLC、HPLC、RAPD指纹图谱，为槲寄生药材规范化研究和质量标准研究提供了参考；其药效学实验为槲寄生药材的进一步开发利用打下了基础，具有进一步研究的意义。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一章槲寄生药材形态组织学研究

1仪器、试剂与样品

2方法

3结果与讨论

4本章小结

第二章槲寄生药材TLC指纹图谱研究

1仪器、试剂与样品

2方法

3结果

4本章小结

第三章槲寄生药材RAPD指纹图谱研究

1仪器、试剂与样品

2方法

3结果

4本章小结

第四章槲寄生药材HPLC指纹图谱研究

1仪器、试剂与样品

2方法与结果

3本章小结

第五章槲寄生药材粗提物斑马鱼活性研究

1材料与方法

2结果

3本章小结

第六章槲寄生药材粗提物MTT活性研究

1仪器、试剂与样品

2方法

3结果

4本章小结

结论

参考文献

·综述· 槲寄生的研究及基应用进展

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致谢

附录