慢性饮酒对大鼠大脑中动脉平滑肌细胞BK通道电流的影响及维生素C的保护作用

摘要

目的：研究慢性饮酒对大鼠大脑中动脉平滑肌细胞（middle cerebrAlartery smooth muscle cell, MCASMC）大电导钙激活钾通道（high-conductance Ca2+-activated K+channel, BK通道）电流的影响及维生素C的保护作用。
　　 方法：备动物模型，将健康雄性SD大鼠随机分为三组：正常对照组，饮酒组和维生素C组。对照组大鼠自由饮水；饮酒组大鼠前12周按2～4g/(kg·d)的浓度自由饮酒，后8周自由饮用含20％（V/V）酒精的水，共饮酒20周；维生素C组是在饮酒组大鼠所饮酒水的基础上加入0.05％（W/V）的维生素C片，溶解后饮用20周。急性酶解法分离大鼠MCASMC，利用全细胞膜片钳技术记录BK通道的电流，观察慢性饮酒对大鼠大脑中动脉 BK通道电流的影响及维生素C的干预作用。
　　 结果:两步酶解法分离得到大鼠MCASMC，细胞多呈梭形，膜表面光滑，轮廓清晰，其外形在对照组、饮酒组和维生素C组之间无显著差异。电压钳模式下测定三组大鼠MCASMC膜电容，分别为15.33±1.36 pF、13.50±1.96 pF和13.44±3.20pF，各组之间均无显著差异（P>0.05）。阶跃方波脉冲方案，钳制电位-80mV，从-60mV 起以10mV阶跃除极至+80mV，测试500ms，采样间隔5s，采样频率5kHz。绘制电流-电压关系曲线，结果证实BK通道电流呈电压依赖性，从+20mV开始呈明显的外向整流特性。记录BK电流，测试比较不同膜电位下大鼠BK通道的电流情况，从+40mV开始除极至+80mV，饮酒组与对照组相比，大鼠MCASMC BK通道电流均显著下降；从-60mV至+80mV，维生素C组与饮酒组相比电流均显著升高，此外在+10mV和+30mV，维生素C组比对照组也有显著升高（P<0.05）。在单电压60mV脉冲刺激下得到大鼠MCASMC的BK通道电流值，饮酒组较对照组显著降低（5.271.27pA/pFvs17.54±±7.77pA/pF，P<0.01），维生素C组较饮酒组显著升高（14.446.36pA/pFvs5.27±±1.27pA/pF，P<0.05）。采用斜坡脉冲方案，从-50mV连续除极至+100mV时电流达最高，记录并比较峰值电流，饮酒组较对照组显著降低（9.911.94pA/pFvs30.18±±10.67pA/pF，P<0.01），维生素C组较饮酒组显著升高（24.198.72pA/pFvs9.911.94pA/pF，P<0.05）。±±
　　 结论：1.慢性饮酒对大鼠大脑中动脉平滑肌细胞BK通道电流具有抑制作用；2. 长期给予维生素C可拮抗慢性饮酒对大鼠MCASMC BK通道的抑制作用。

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综述 血管平滑肌BK通道的调节及其与心血管疾病的关系

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