内毒素对大鼠原代肝星状细胞及肝纤维化过程中肝脏内ERK1/2信号通路的影响

摘要

[目的]研究内毒素刺激大鼠原代肝星状细胞增殖活化过程中ERK1/2信号转导通路的影响及机制，为肝脏纤维化的预防和治疗，提供了一定的理论实验基础。
　　 [方法]采用链霉蛋白酶、Ⅳ型胶原酶循环灌注消化大鼠肝脏，经密度梯度高速离心，分离培养大鼠原代肝星状细胞，细胞活率采用台盼兰拒染实验鉴定，HSCs鉴定通过结蛋白(desmin)免疫细胞化学法。将培养至第3天的HSCs随机分为正常对照组、内毒素组以及PDTC组，后两组加入终浓度为1μg/ml的内毒素刺激细胞，PDTC组同时加入终浓度为15μmol/L的PDTC,30min后收集各孔HSCs，采用BCA法提取细胞总蛋白，通过WesternBlot检测HSCs内P-ERK1/2水平。
　　 [结果]内毒素刺激原代培养的HSCs后，与正常对照组相比，ERK1/2磷酸化水平明显上升(P＜0.01)，而PDTC能显著降低该变化。
　　 [结论]内毒素可直接刺激大鼠原代HSCs引起细胞内ERK1/2信号传导通路活化，NF-κB信号通路可能是内毒素刺激原代HSCs导致ERK1/2信号通路活化的重要途径之一。