胞外pH值梯度改变对大鼠冠状动脉环张力的影响及机制探讨

摘要

实验目的：观察细胞外pH值梯度改变(pH7.4~6.4，7.4~8.4)对大鼠冠状动脉环张力的影响并探讨其机制。
　　实验方法：大鼠断头处死后迅速分离出冠状动脉，并固定于离体微动脉环张力测定仪的换能器上，使用PowerLab记录冠状动脉环张力变化。观察pH值梯度降低（pH=7.4，7.2，7.0，6.8，6.6，6.4）对大鼠冠脉环张力的影响；观察pH值梯度升高（pH=7.4，7.6，7.8，8.0，8.2，8.4）对大鼠冠脉环张力的影响；孵育工具药物NPPB，AM，KB-R7943，LaCl3，L-NAME和改变浴液钙离子以探究氯通道，Na+/H+交换，Na+/Ca2+交换，Ca2+通道，一氧化氮，及外钙内流内钙释放是否参与前述改变。
　　实验结果：
　　1、静息状态下，大鼠冠状动脉环的基础张力随细胞外环境pH值的梯度降低(pH7.4~6.4)而逐渐升高。偏酸性环境下（pH值=7.2，7.0，6.8，6.6，6.4时）冠状动脉环的张力分别为（0.04±0.01）mN，（0.29±0.05）mN，（2.71±0.34）mN，（2.72±0.37）mN，（2.66±0.41）mN。为此我们选定pH值为6.8来研究偏酸性环境下大鼠冠状动脉环收缩的机制。
　　2、静息状态下，pH值梯度升高(pH7.4~8.4)对大鼠冠状动脉环的基础张力无影响。偏碱性环境下（pH值=7.6，7.8，8.0，8.2，8.4时）冠状动脉环的张力分别为（0.03±0.01）mN，（0.07±0.01）mN，（0.09±0.03）mN，（0.13±0.02）mN，（0.15±0.02）mN。
　　3、孵育3×10-2mmol/l的NPPB可以显著减弱酸性环境诱导的大鼠冠状动脉环收缩，冠状动脉环的张力分别为（2.99±0.42）mNVS（1.07±0.12）mN，P=0.001。
　　4、孵育3×10-2mmol/l的AM可以显著减弱酸性环境诱导的大鼠冠状动脉环收缩，冠状动脉环的张力分别为（2.77±0.47）mNVS（2.13±0.35）mN，P=0.026。
　　5、孵育1×10-2mmol/l的KB-R7943可以显著减弱酸性环境诱导的大鼠冠状动脉环收缩，冠状动脉环的张力分别为（2.59±0.53）VS（1.04±0.14）mN，P=0.001。
　　6、孵育5mmol/l的LaCl3可以显著减弱酸性环境诱导的大鼠冠状动脉环收缩，冠状动脉环的张力分别为（2.89±0.65）mNVS（0.11±0.02）mN，P=0.001。
　　7、孵育0.1mmol/l的L-NAME可以显著增强酸性环境诱导的大鼠冠状动脉环收缩，冠状动脉环的张力分别为（2.75±0.22）mNVS（4.17±1.06）mN，P=0.02。
　　8、浴液中无钙（Ca2+-free）时，酸性环境轻仅微收缩大鼠冠状动脉环，冠状动脉环的张力为（2.55±0.29）mNVS（0.21±0.02）mN，P=0.001；浴液钙离子正常（2.5mM）时，恢复了酸性环境对大鼠冠状动脉环的收缩，（2.3±0.31）mN。
　　实验结论：
　　1、细胞外酸性环境可收缩大鼠冠状动脉环，细胞外碱性环境对大鼠冠状动脉环张力无影响。
　　2、酸性细胞外环境（pH=6.8）收缩大鼠冠状动脉环与阻断Cl-通道、Na+/H+交换、Na+/Ca2+交换、Ca2+通道、一氧化氮生成以及诱发内钙释放有关。

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中英文名称对照表

中文摘要

英文摘要

前 言

1 实验材料

1.1 实验药品

1.2 实验溶液

1.3 主要实验仪器

1.4 实验用动物

2 实验方法

2.1 大鼠冠状动脉环（Coronary arterioles, CA）的制备和固定

2.2 血管活性的检测

2.3 血管环正式实验

2.4 统计学分析

3 实验结果

3.1 细胞外环境pH值梯度降低对大鼠冠状动脉环张力的影响

3.2 细胞外环境pH值梯度增加对大鼠冠状动脉环张力的影响

3.3 氯离子通道在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

3.4 Na+/H+交换体在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

3.5 Na+/Ca2+交换体在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

3.6 钙离子通道在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

3.7 外钙内流和内钙释放在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

3.8 一氧化氮合酶在pH=6.8时大鼠冠状动脉环收缩中的作用

4 讨 论

5结 论

参考文献

综 述

致谢

个人简历