不同浓度胎牛血清对大鼠髓核间充质干细胞生物学特性影响

摘要

目的：研究大鼠髓核间充质干细胞(NPMSC)体外培养的最佳血清浓度并探讨椎间盘退变的机制。 方法：用胶原酶、胰酶序贯消化法从SD大鼠腰部和尾部的椎间盘组织中提取NPMSC，并进行体外培养，将其传代。 (1)利用流式细胞仪对第3代传代的NPMSC细胞表型CD29、CD34、CD24、CD90、CD105进行鉴定; (2)利用普通PCR鉴定体外培养的NPMSC细胞基因Sox2、Nanog的表达; (3)在37℃、21％O2、5％CO2的细胞培养箱中用成骨、成软骨、成脂培养液诱导培养第3代传代NPMSC，2～4周以后，用染色剂对其进行染色，观察其成脂、成骨、成软骨能力。 (4)在37℃、21％O2、5％CO2的细胞培养箱中用不同浓度(0％、5％、10％、20％、30％)的DMEM-F12血清培养液培养第3代传代的NPMSC，72小时以后，利用CCK-8法检测细胞的增殖，并采用RT-PCR检测细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9的mRNA表达，借助流式细胞仪对细胞进行细胞凋亡的检测。 结果： (1)大鼠NPMSC的成骨、成软骨能力强，成脂能力较差，且其细胞表面高度表达CD29、CD90、CD105，低度表达CD24、CD34，细胞基因Sox2、Nanog高度表达。 (2)随着培养液血清浓度增加，OD值增大，NPMSC的凋亡率降低，细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9基因的mRNA表达增加。 结论： (1)大鼠NPMSC具有间充质干细胞特性; (2)细胞外营养影响大鼠NPMSC的增殖、分泌、凋亡。

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摘要

英文缩略词表

前言

第一部分 大鼠髓核间充质干细胞的鉴定

材料和方法

结果

讨论

第二部分 不同浓度胎牛血清对大鼠髓核间充质干细胞生物学特性影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述 椎间盘营养供应与椎间盘退行性变的关系

个人简介及导师简介

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