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叶酸拮抗维甲酸诱导对BALB/c小鼠腭突间充质细胞凋亡影响的机制研究

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摘要

缩略词表

前言

第一部分 比较研究三种检测BALB/c小鼠受孕的方法

第二部分 维甲酸诱导建立BALB/c小鼠腭裂模型

第三部分 培养并鉴定BALB/C小鼠腭突间充质细胞

第四部分 叶酸拮抗维甲酸诱导BABL/C小鼠腭突间充质细胞凋亡的机制研究

结论

参考文献

综述 叶酸补充与唇腭裂预防相关研究进展

攻读学位期间发表文章情况

致谢

个人简历

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摘要

目的:从细胞水平对维甲酸致BALB/c小鼠腭裂畸形作用和叶酸是否有拮抗维甲酸的致畸作用及其机制进行研究。 方法:本研究主要分为四部分进行,首先对三种检测BALB/c小鼠受孕方法进行比较研究,得到简便、可靠的判定小鼠受孕与否的方法;其次对维甲酸诱导BALB/c小鼠建立腭裂模型的合适给药时间和剂量进行探索,获得一种稳定、可靠的小鼠腭裂模型;然后分离培养妊娠17天小鼠胚胎腭突间充质细胞(EPM cells),对其生物学性质进行研究;最后分别分离培养腭裂组和正常组小鼠相同孕期胚胎EPM cells,采用TUNEL法对两组加入不同浓度叶酸与未加入叶酸的细胞凋亡情况进行检测。 结果:在对受孕10天(GD10)及后期孕鼠的检测方法中,称量体重的方法检测孕鼠受孕的灵敏度为0.96,特异度为0.94;在GD10天时给予BALB/c小鼠管饲50mg/kg维甲酸,活胎鼠中腭裂发生率高达93.59%;腭裂组小鼠EPEcells较正常组凋亡明显增多(P<0.05)。对腭裂组EPEcells添加叶酸后细胞凋亡显著减少(P<0.05)。对正常组EPEcells添加叶酸后细胞凋亡无明显变化(P>0.05)。 结论:维甲酸可以明显促进其诱导建立的BALB/c腭裂小鼠EPE cells凋亡,外源性补充叶酸可在一定程度上拮抗维甲酸这一作用。

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