miRNA--21在UUO幼年大鼠肾组织中的表达趋势及药物干预的效果

摘要

目的:通过幼年大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)建立肾间质纤维化模型，观察肾组织中microRNA-21的表达趋势，探讨其对肾间质纤维化的影响，以及予雷公藤多苷干预的效果。 方法:选择4-5周龄雄性SD大鼠54只，体重80-100g，随机等分成三组:假手术组、UUO模型组、雷公藤多苷干预组，每组各18只。模型组及雷公藤多苷干预组大鼠均采用单侧输尿管结扎法构建肾间质纤维化模型，假手术组只分离不结扎输尿管。雷公藤多苷干预组自术后第1天起予雷公藤多苷10mg/Kg·d灌胃，其余两组予等量生理盐水灌胃。各组分别于术后3、7、14天随机处死6只大鼠取其左肾，采用masson染色观察各时间点各组大鼠肾间质纤维化的程度，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠肾组织中miRNA-21的表达水平。 结果:1.采用单侧输尿管梗阻建立大鼠肾间质纤维化模型成功，模型组及雷公藤多苷干预组可见离体梗阻侧肾体积明显变大，肾皮质变薄。2.Masson染色结果:假手术组胶原阳染主要位于肾小囊、肾小管基膜及毛细血管周围，肾小管间质中无阳染。模型组:随梗阻时间延长，肾间质中胶原纤维阳染面积逐渐增多，各时间点比较差异有显著性(P＜0.01)。雷公藤多苷干预组各时间点肾间质胶原纤维阳染面积较模型组明显减少(P＜0.01)，但仍多于假手术组(P＜0.01)。3.各时间点各组大鼠肾组织miRNA-21表达情况:假手术组大鼠肾组织中miRNA-21仅有少量基础性表达，各时间点组内比较差异具有显著性(P＞0.05)。与假手术组相比，UUO模型组大鼠肾组织miRNA-21表达显著增加(P＜0.01)，且随梗阻时间的延长，其表达水平呈持续增高，各时间点组内比较差别有显著性(P＜0.01)。雷公藤多苷干预组:予雷公藤多苷干预后，大鼠肾组织miRNA-21表达明显下降(P＜0.01)，且各时间点组内比较差异有显著性(P＜0.01)。 结论:在幼年大鼠单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化模型中，随着梗阻时间的延长，肾间质纤维化程度逐渐加重，肾组织中miRNA-21的表达呈持续上升，提示miRNA-21表达上调可能促进肾间质纤维化的发生;予免疫抑制剂雷公藤多苷干预后miRNA-21表达下调，提示其可能通过下调miRNA-21的表达发挥抗肾间质纤维化作用。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1．实验材料及试剂

2．实验方法

3．统计分析

结果

1．术后大鼠一般状况

2．肾脏大体改变

3．各时间点各组大鼠肾组织常规病理半定量结果分析

4．RT-PCR结果分析

讨论

结论

参考文献

综述 microRNA-21与肾间质纤维化的研究进展

附录

攻读学位期间发表文章情况

致谢

个人简历