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大鼠颈脊髓慢性压迫后哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达

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前言

1 材料与方法

1.1实验动物

1.2慢性吸水膨胀材料

1.3主要仪器与试剂

1.4大鼠慢性脊髓压迫模型的制备

1.5动物分组

1.6运动功能评分

1.7影像学观察

1.8组织学观察

1.9统计学方法

2 结 果

2.1BBB评分

2.2材料膨胀曲线

2.3MRI结果

2.4HE染色

2.5TUNEL染色

2.6免疫组化

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:保守与手术:脊髓型颈椎病的治疗方案

在学期间发表的学术论文与研究成果

致谢

个人简历

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摘要

目的:
  目前对于慢性轻度压迫的脊髓型颈椎病尚缺乏理想的实验动物模型。本实验通过将新型慢性吸水膨胀性材料植入大鼠椎管而模拟脊髓型颈椎病的发病过程,进而研究此模型中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(The mammalian target of rapamycin,mTOR)表达与髓内细胞凋亡,并探讨mTOR与凋亡在脊髓损伤及修复过程中的作用。
  方法:
  将吸水膨胀性材料通过后路手术植入雄性 SD大鼠椎管内并作为实验组,对照组将材料植入后立即取出,实验组与对照组各15只大鼠。每日评测大鼠BBB运动功能评分。分别于术后1天、3天、7天、10天及14天对大鼠进行MRI检测,然后处死大鼠,将脊髓制成组织切片。最后通过HE染色观察组织细胞形态学改变;通过TUNEL染色观察脊髓内凋亡细胞数量;并通过免疫组化法检测mTOR表达。
  结果:
  术后3天内所有大鼠BBB评分恢复正常;MRI显示随着时间推移,脊髓受压逐渐明显,但水肿逐渐消退,切口瘢痕组织形成,周围软组织轻度水肿,未见出血及脊髓软化;HE染色显示髓内水肿,细胞空泡样变,运动神经元数量减少以后角更为明显,各组大鼠脊髓受压部位内可见轻度炎性细胞浸润;TUNEL染色显示各时间点实验组大鼠脊髓内凋亡细胞数目高于对照组,差异具有统计学意义,但实验组内对比无统计学差异;免疫组化结果显示实验组中单位面积内mTOR阳性细胞的数量呈先增高再降低的趋势,在7天时达到顶峰,且与其他实验组数据对比具有统计学差异。各时间点对照组的单位面积内mTOR阳性细胞的数量无统计学差异。实验组中单位面积内mTOR阳性细胞的数量始终低于对照组,差异具有统计学意义。
  结论:
  大鼠颈脊髓在受到持续性轻度压迫后,mTOR信号通路被激活。该信号通路的激活具有神经保护的功能,但其机制在急性期与亚急性、慢性期中有所不同。轻度的脊髓受压并未引起髓内严重的细胞凋亡,轻度脊髓损伤后的脊髓自发性修复在神经功能恢复过程中起到了一定的作用。

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