曲古霉素A对结直肠癌Lovo细胞株5-氟尿嘧啶化疗敏感性的影响及可能机制的研究

摘要

目的： 探讨5-氟尿嘧啶（5-FU）、曲古霉素A（TSA）对Lovo细胞株生物学行为的影响和TSA对 Lovo细胞株5-FU化疗敏感性的影响及可能的机制。 方法： 选取结直肠癌Lovo细胞株，将实验分为5组：对照组、5-FU组、TSA组、TSA预处理组、联合组（TSA+5-FU）。 (1)MTT法及软琼脂集落形成实验：对各组细胞加药后的增殖水平进行检测。 (2)Transwell肿瘤细胞侵袭实验及划痕愈合实验：对干预24 h后各组细胞的侵袭和迁移能力进行检测。 (3)流式细胞术：对干预24 h后各组细胞的凋亡率水平及细胞周期各时相比例进行检测。 (4)Western-blot法：对干预24 h后各细胞组胸苷酸合酶（TS）蛋白的表达情况进行检测。 结果： (1)MTT细胞增殖检测：与对照组相比，5-FU组、TSA预处理组及联合组细胞24 h、48 h和72 h生长受到抑制（p<0.05），TSA组细胞48 h和72 h生长受到抑制（p<0.05）；与5-FU组相比，TSA预处理组及联合组细胞48 h、72 h生长抑制明显（p<0.05），TSA预处理组与联合组细胞生长抑制不具有统计学差异（p>0.05）。 (2)软琼脂集落形成实验：与对照组相比，各用药组集落形成数均明显下降（p<0.05），与5-FU组相比，TSA预处理组与联合组细胞集落形成数减少显著（p<0.05），预处理组与联合组之间差异不明显（p>0.05）。 (3)细胞侵袭及迁移能力检测：与对照组相比，各用药组的穿膜数及划痕愈合率都有所下降（p<0.05），TSA预处理组及联合组与5-FU组比较，细胞穿膜数和划痕愈合率下降明显（p<0.05），而TSA预处理组与联合组之间差异不显著（p>0.05）。 (4)细胞凋亡检测：与对照组比较，各加药组细胞凋亡比例增加明显（p<0.05），与5-FU组比较，TSA预处理组及联合组细胞凋亡比例升高显著（p<0.05），而TSA预处理组与联合组之间细胞凋亡比例差异不明显（p>0.05）。 (5)细胞周期检测：与对照组相比，各用药组在细胞周期各时相的比例变化无显著差异（p>0.05）。 (6)TS蛋白表达检测：与对照组相比，5-FU组TS表达无明显差异（p>0.05），TSA组、TSA预处理组及联合组细胞TS表达明显下调（p<0.05）；与5-FU组相比，TSA组、TSA预处理组及联合组细胞TS表达显著减少（p<0.05），TSA组、TSA预处理组及联合组细胞TS表达差异不明显（p>0.05）。 结论： (1)5-FU、TSA均可抑制Lovo细胞的增殖、侵袭和迁移，促进Lovo细胞凋亡。 (2)TSA可在一定程度上增强结直肠癌Lovo细胞对5-FU的化疗敏感性，这种作用可能是通过下调TS蛋白的表达实现的。