吸烟冠心病患者HDL对THP细胞胆固醇逆转运的影响及机制

摘要

目的：通过提取正常健康人及吸烟冠心病患者的HDL培养THP-1细胞源性泡沫细胞，观察吸烟冠心病患者的HDL对其胆固醇逆转运的影响及机制，为吸烟促进动脉粥样硬化发病机制提供理论基础。
　　方法：采集正常健康人群及吸烟冠心病人群血样，利用超高速离心机提取高密度脂蛋白（HDL）；利用佛波酯诱导THP-1细胞成为巨噬细胞，然后利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL）诱导上述细胞形成泡沫细胞，并将其分为3组，分别为：空白对照组、正常人HDL组、吸烟冠心病HDL组。利用油红O染色观察分组泡沫细胞内脂滴情况；利用液体闪烁计数仪从表观现象方面检测各组细胞相应的胆固醇流出率；采用Western blot检测以上3组三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、三磷酸腺苷结合转运体G1（ABCG1）、B类Ⅰ型清道夫受体（SR-BI）相应蛋白质含量。
　　结果：⑴成功提取人HDL，并鉴定；⑵佛波酯成功诱导THP-1细胞形成泡沫细胞， ox-LDL成功诱导泡沫细胞形成；⑶和空白对照组相比，正常人HDL及吸烟冠心病HDL组均可使胆固醇流出率增加（P<0.05），正常人HDL组作用较吸烟冠心病HDL组作用显著（P<0.05）；⑷与空白对照组相比，正常人HDL组ABCA1、ABCG1蛋白表达无明显变化，吸烟冠心病HDL组ABCA1、ABCG1蛋白表达显著减少（P<0.05）；⑸与空白对照组相比，正常人HDL组及吸烟冠心病HDL组SR-B1蛋白表达显著升高，正常人HDL组作用较吸烟冠心病HDL组作用显著（P<0.05）。
　　结论：正常人HDL可以促进THP-1细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运。其可以促进胆固醇流出，且可以升高SR-B1蛋白表达，但是其并不影响ABCA1、ABCG1的蛋白表达量，而吸烟冠心病人HDL相比正常人HDL，促进胆固醇流出作用及升高SR-B1蛋白表达作用减弱，且可以显著减低ABCA1、ABCG1蛋白表达量，为吸烟促进动AS发病机制提供理论基础，从而减弱或者避免AS发生和发展，为冠状动脉粥样硬化性心脏病的临床预防和治疗提供理论依据。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料和方法

1.1 实验细胞

1.2 实验试剂

1.3 实验仪器

1.4主要溶液配制

1.5健康人和吸烟冠心病患者血浆HDL提取

1.6 细胞培养

1.7 实验分组处理

1.8 油红O染色检测脂滴

1.9液体闪烁计数仪检测细胞内的胆固醇流出率

1.10 Western-blot检测各指标蛋白水平

1.11 统计学分析

2 结 果

2.1 研究人群的主要特征

2.2 血浆中HDL的提取与纯度鉴定

2.3油红O染色检测脂滴

2.4 吸烟冠心病患者HDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出的影响

2.5吸烟冠心病人HDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因表达的影响

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:心血管疾病潜在治疗靶点——高密度脂蛋白的胆固醇逆转运作用

致谢

个人简历