氨基胍对大鼠体外全骨髓诱导破骨细胞分化的影响

摘要

目的：
　　研究不同浓度氨基胍对大鼠体外全骨髓诱导破骨细胞分化的影响，为骨质疏松性疾病药物治疗提供实验依据。
　　方法：
　　选用全骨髓诱导法培养破骨细胞（Osteoclast，OC），在培养当天各组分别加入浓度为0mM、0.1mM、1mM、2.5mM的氨基胍（Aminoguanidine，AG），于第10天行抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色，观察TRAP阳性细胞数的差异；于培养第10天进行扫描电镜检测骨陷窝发生的情况；于培养第10天收集细胞行RT-PCR检测，测定OC特异性标志物核因子-κB受体活化因子（Receptor activator of nuclear，RANK）和组织蛋白酶K（CathepsinK，CK） mRNA的表达量；于培养第10天收集细胞行Western Blot检测OC活化信号通道蛋白P38和P65的表达量，及其测晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products，AGEs）和晚期糖基化终末产物受体（Receptor for advanced glycation end products，AGER）的表达量。
　　结果：
　　TRAP染色观察示：不同浓度AG干预后，能够起到促进OC生成的作用,随AG浓度增加，出现红染细胞数逐渐增多，各组间差异有统计学意义，P<0.05；骨吸收实验示：不同浓度AG干预后，能够促进骨陷窝生成；RT-PCR检测结果示：不同浓度AG干预后，能够促进OC形成，随AG浓度的增加，OC特异标志物RANK和CathepsinK的mRNA表达量逐渐增加，各组间差异有统计学意义；Western Blot检测结果示：不同浓度AG干预后，能够促进OC形成，随AG浓度的增加，P38和P65的表达量逐渐增加，同时检测AGEs及其受体AGER的表达量逐渐降低，差异有统计学意义。
　　结论：
　　1. AG可以降低体外全骨髓诱导OC中AGEs和AGER的含量，在本实验中起到了抑制AGEs及其受体AGER的作用，呈剂量依赖性。
　　2. AG能够增加体外全骨髓诱导OC的形成，在本实验浓度范围内促进了OC分化，呈剂量依赖性。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

1.3 统计学分析

2 结 果

2.1 倒置相差显微镜观察细胞形态

2.2 TRAP染色结果

2.3 骨吸收结果

2.4 RT-PCR结果

2.5 Western-Blot检测结果

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:破骨细胞分化机理的研究

附录

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