甲醛对肝细胞脂代谢相关基因表达的影响

摘要

目的：
　　通过观察甲醛（FA）对HepG2细胞内外甘油三酯（TG）和游离胆固醇（FC）含量以及脂代谢相关基因表达水平的影响，来探讨甲醛致肝损伤的可能机制。
　　方法：
　　以0.004、0.02、0.1 mmol/L FA分别处理人肝癌HepG2细胞24和48 h，采用POD酶法测定细胞内外TG和FC含量,采用QRT-PCR法检测细胞内与TG代谢相关基因：固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1）、二脂酰甘油酰基转移酶2（DGAT2）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAPα）、酯酰肉碱转移酶1（CPT1）、微粒体甘油三酯转运蛋白（MTTP）、载脂蛋白B100（apoB100）、载脂蛋白E（apoE）、羧酸脂酶3（CES3）、二脂酰甘油酰基转移酶1（DGAT1）、包被蛋白II（COPⅡ）、Sar1b和与FC代谢相关基因：固醇调节元件结合蛋白2（SREBP-2）、SREBP裂解激活蛋白（SCAP）、胰岛素诱导基因1（Insig1）、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）、低密度脂蛋白受体（LDLR）的表达水平。
　　结果：
　　第一部分：（1）与阴性对照组相比，甲醛各剂量组染毒48 h可使HepG2细胞内TG含量明显减少（P<0.05），染毒24 h可使上清中TG含量明显增加（P<0.05）；（2）与阴性对照组相比，染毒48 h，甲醛各剂量组细胞内PPAPα基因表达水平明显降低（P<0.05）；染毒24 h，0.004 mmol/L FA组或染毒48 h，0.1 mmol/L FA组细胞内CPT1基因表达水平明显降低（P<0.05）；（3）与阴性对照组相比，染毒24 h，0.004 mmol/L FA组或染毒48 h，甲醛各剂量组细胞内MTTP基因表达水平明显升高（P<0.05）；染毒24 h，甲醛各剂量组或染毒48 h，0.004 mmol/L FA组细胞内apoB100基因表达水平明显升高（P<0.05）。
　　第二部分：（1）与阴性对照组相比，甲醛各剂量组染毒24和48 h均可使HepG2细胞内FC含量明显增加（P<0.05），且0.004和0.02 mmol/L FA染毒48 h还可使上清中FC含量明显减少（P<0.05）；（2）与阴性对照组相比，染毒24 h，甲醛各剂量组细胞内HMGCR基因表达水平明显升高（P<0.05），染毒48 h，0.1 mmol/L FA组细胞内 HMGCR基因表达水平明显降低（P<0.05）；（3）与阴性对照组相比，染毒48 h，0.02和0.1 mmol/L FA组细胞内LDLR基因表达水平明显升高（P<0.05）。
　　结论：
　　（1）甲醛可能通过减少HepG2细胞内PPARα及CPT1基因的表达来抑制肝脏脂肪酸的β-氧化，同时可能通过增加MTTP和apoB100基因的表达来促进VLDL的分泌外排。
　　（2）短期内甲醛可能通过增加HepG2细胞内HMGCR基因的表达来促进FC的合成，随着作用时间的延长可能通过增加LDLR基因的表达而使细胞内FC水平升高，进而反馈抑制HMGCR基因的表达。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料与方法

1.1 细胞株

1.2 主要仪器与试剂

1.3 细胞的复苏、培养、传代及冻存

1.4 实验分组及染毒

1.5 实验方法

1.6 统计学方法

2 结 果

2.1 甲醛对HepG2细胞TG含量及其代谢相关基因表达水平的影响

2.2 甲醛对HepG2细胞FC含量及其代谢相关基因表达水平的影响

3 讨 论

3.1 甲醛对HepG2细胞TG代谢的影响

3.2 甲醛对HepG2细胞FC代谢的影响

4 结 论

参考文献

综述:脂代谢紊乱与疾病

致谢

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