声明
第一章 绪论
1.1 肝毒评模型的研究现状
1.1.1 毒理学研究的主要方式
1.1.2 HepaRG细胞的形态学特征
1.1.3 HepaRG聚球体3D模型的优势
1.2 研究的目的及意义
第二章 HepG2和HepaRG细胞模型的建立及对比
2.1 实验材料与仪器
2.1.1细胞
2.1.2实验试剂与试剂盒
2.1.3实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1细胞的冻存与复苏
2.2.2 2D/3D HepG2和HepaRG细胞模型的建立
2.2.3 HepG2和HepaRG细胞HE染色实验
2.2.4 尿素含量测定
2.2.5白蛋白在转录及翻译水平的检测
2.2.6数据处理与分析
2.3 实验结果
2.3.1 2D/3D 细胞的生长结构和功能
2.3.2 HepG2和HepaRG细胞HE染色实验
2.3.3尿素生成水平检测
2.3.4白蛋白在转录及翻译层面的表达水平检测
2.3.5其他功能蛋白的Westen-blot实验
2.4 小结和讨论
第三章 2D/3D HepaRG细胞体外药物肝毒评模型的对比
3.1 实验材料与仪器
3.1.1 细胞
3.1.2实验试剂与试剂盒
3.1.3 主要仪器
3.2 实验方法
3.2.1 RNA提取及RT-PCR分析
3.2.2 2D/3D HepaRG细胞免疫荧光染色实验
3.2.3糖原含量测定实验
3.2.4 数据处理及分析
3.3 实验结果
3.3.1 2D与3D HepaRG细胞的基因表达水平
3.3.2 2D与3D HepaRG 细胞中糖原的储存检测
3.3.3 2D与3D HepaRG细胞免疫荧光染色
3.4 小结与讨论
第四章 肝毒性药物对2D/3D HepaRG细胞模型的毒性作用研究
4.1 实验材料与仪器
4.1.1 细胞
4.1.2主要试剂
4.1.3主要仪器设备
4.1.4 药物
4.2 实验方法
4.2.1 药品配置
4.2.2 药物毒性实验
4.3 实验结果
4.3.1 APAP和ASP对细胞的毒性作用分析
4.3.2 胆汁淤积风险的药物对HepaRG细胞模型的影响
4.4 小结与讨论
总结与展望
参考文献
附录
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
