玉米转录因子克隆及抗逆功能分析

摘要

干旱、高盐、低温等非生物逆境严重影响植物的生长发育和农作物的产量。我国的农业基础薄弱，耕地有效灌溉面积不足47％，中低产田约占2/3，抗灾能力较弱，干旱、低温和土壤盐渍化是影响我国农业生产的严重问题。玉米我国主要的粮食，并且其种植量在逐渐增加。所以运用现代的分子生物学技术，阐明植物抗逆机制，以获得抗逆性优良的转基因玉米品种非常重要。
　　 目前已有人通过玉米全基因组序列分析和生物信息学计算，预测了玉米中所有编码转录因子的基因，从中排除掉与水稻、拟南芥(蛋白)同源性高于55％的基因，而获得了玉米特异的转录因子库。
　　 本论文通过克隆得到转录因子CDS序列，转化拟南芥与玉米，获得高表达与受抑制的转化体，并分析激素处理与各种胁迫条件下的基因表达模式，从而研究其基因功能，为作物抗逆转基因育种研究提供基因资源并奠定理论基础。
　　 通过本论文的研究工作得到的主要结论如下：
　　 1.通过gateway系统将克隆出来的玉米转录因子的CDS序列克隆到目的载体pGWEAR/pGWVP64。花序浸泡转化，获得转基因拟南芥，农杆菌侵染化，获得转基因玉米植株。
　　 2.对能克隆出来的转录因子进行亚细胞定位分析而得到zmtf04、zmtf10、zmtf25在细胞核中表达，为研究该转录因子的分子机制奠定了重要的基础。当玉米齐319在蛭石培养至三叶一芯时，对其进行六种(H2O、NaCl、PEG、ABA、GA、SA)不同处理，六个(0.5h、1h、3h、6h、9h、24h)时间点并且地上与地下部分别取材，用Real-Time PcR表达谱分析，发现zmtf10可能和抗旱、抗盐有一定的关系，为将来的工作打下坚实的基础。