马拉硫磷、灭多威混配制剂生物标志物测定方法的研究

摘要

研究目的:建立尿液中马拉硫磷3种代谢产物磷酸二甲酯(imethylphosphate DMP)、二甲基硫代磷酸酯（Dimethyl thiophosphrate DMTP）、二甲基二硫代磷酸酯（Dimethyl dithiophosphrate DMDTP）和灭多威的固相萃取-气相色谱/质谱联用(SPE-GS/MS)快速定性定量的分析方法，并利用该方法对大鼠尿液中马拉硫磷3种代谢产物、灭多威进行了研究。
　　 研究方法:以空白尿样加磷酸二甲酯、二甲基硫代磷酸酯、二甲基二硫代磷酸酯及灭多威标准品，对尿样进行前处理方法、气相色谱-质谱条件、回收率、特异性、精密度、检出限、稳定性进行全面考察，建立SPE-GS/MC快速定性定量分析方法:
　　 采用SPE-GS/MS法:在一定的条件下测定不同时间段内大鼠尿液中马拉硫磷3种代谢产物和灭多威的浓度。并同时测定不同时间段内大鼠尿肌酐的含量，进行校准待测物质含量。大鼠灌胃后，收集0.5h，1h，2h，3h，6h，9h，12h，15h，18h，21h，24h的全部大鼠尿，并对24h内对各组大鼠尿液中马拉硫磷3种代谢产物、灭多威各自的浓度变化进行描述。
　　 研究结果:马拉硫磷3种代谢产物和灭多威在11.2 min内得到良好分离，DMP、DMTP、DMDTP、灭多威的保留时间(min)分别是:4.632、4.858、7.275、6.039。加标回收率大于87.9％，相对标准偏差小于8.9％，样品-20℃放置2周后相对偏差小于9.4％，DMP、DMTP、DMDTP、灭多威大鼠尿液中的最低检出浓度分别为3.0、0.30、4.0、0.4μg/ml(S/N=3)，并在灌胃后在不同时间段内检测到3种代谢产物和灭多威。
　　 研究结论:所建立的分析方法简单、准确、快速、灵敏，具有较好的实验重复性，是一种简单的净化提取和准确可靠的气相色谱质谱检测方法，可对大鼠尿液中马拉硫磷3种代谢产物及灭多威进行定性定量的检测，为应用于职业暴露人群马拉硫磷、灭多威、马拉硫磷灭多威混配农药接触水平的检测提供了参考。

目录

声明

摘要

主要符号表

前言

第一部分 尿液中马拉硫磷、灭多威混配制剂生物标志物测定方法的研究

材料与方法

1 材料

2 方法

3 分析方法的确证

结果

1．质谱结果

2 气相色谱图结果

讨论

1 色谱质谱条件优化

2 尿样处理方法的优化

3 待测物质挥发性分析

4 Waters Sep-pakC18固相小柱的再生

小结

第二部分 大鼠尿液中马拉硫磷、灭多威混配制剂生物标志物测定实验研究

材料与方法

1 材料

2 方法

3 分析方法的确证

结果

1 大鼠灌胃后症状及变化

2 气相色谱-质谱图结果

3 大鼠灌胃后检测到待测物质含量分析

讨论

1 尿肌酐检测

2 马拉硫磷中毒

3 灭多威中毒

4 混合农药中毒

小结

参考文献

综述 马拉硫磷遗传毒性研究进展

附录 一、攻读硕士期间已(待)发表论文

致谢