白鲜皮化学成分及药理活性研究

摘要

目的:对芸香科白鲜属植物白鲜（Dictamnus dasycarpus Turcz.）干燥根皮的化学成分进行分离鉴定，对其中8种化学成分进行细胞毒试验，通过建立高效液相色谱方法对白鲜皮中柠檬苦素、黄柏酮、梣酮三种活性成分进行含量测定，探讨不同提取溶剂对三种成分提取得率的影响，优化白鲜皮中三种成分的提取工艺，为确定最优提取工艺奠定基础。
　　方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、C18反相色谱柱层析、半制备液相等技术手段，并结合化合物的理化性质，运用红外、紫外、液质联用技术、核磁共振氢谱及碳谱等波谱技术鉴定化合物结构;通过MTT法研究dictamnin A、dictamninB、如忒文、黄柏酮、梣酮、柠檬苦素、fraxinellonone、白鲜碱8种化学成分对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用，通过PI染色法研究化合物dictamnin A、B对A549细胞周期的影响;采用高效液相色谱技术建立同时测定白鲜皮中柠檬苦素、黄柏酮、梣酮三种活性成分含量的方法，通过测定甲醇，乙醇，二氯甲烷，丙酮，乙腈5种不同提取溶剂中这三种活性成分的提取得率，确定最优提取溶剂，优化提取工艺。
　　结果:从白鲜皮中共分离19个化合物，其中鉴定了17个化合物，分别是dictamninA(Ⅰ)，dictamnin B(Ⅱ)，梣酮(Ⅲ)，柠檬苦素(Ⅳ)，fraxinellonone(Ⅴ)，如忒文(Ⅵ)，黄柏酮(Ⅶ)，白鲜碱(Ⅷ)，3β-羟基-胆甾-5-烯(Ⅸ)，5-羟甲基糠醛(Ⅹ)，芦丁(Ⅺ)，槲皮素(Ⅻ)，东莨菪内酯(ⅩⅢ)，胡萝卜苷(ⅩⅣ)，β-谷甾醇(ⅩⅤ)，dasycarine(ⅩⅥ)，7α-obacunyl acetate(ⅩⅦ)。化合物(ⅩⅧ)～(ⅩⅨ)的结构尚在解析和鉴定中。其中化合物(Ⅰ)，(Ⅱ)为新化合物。化合物(Ⅸ)，(Ⅹ)为首次从白鲜属中分离得到。
　　通过MTT法研究8个化合物对人肺癌细胞A549的细胞毒作用，结果表明dictamninA、dictamnin B均具有较强细胞毒作用，白鲜碱次之，黄柏酮、如忒文、fraxinellonone、柠檬苦素活性较弱、梣酮无活性;通过PI染色法进一步探讨化合物dictamnin A、dictamninB对人肺癌细胞A549细胞周期的影响，实验结果表明dictamnin A、B可明显改变A549的细胞周期，表现为G1期细胞数量明显高于对照组(70.1％)，分别为85.5％及85.1％，说明dictamnin A、B通过作用于A549细胞的G1期，从而抑制细胞周期的进程，促进细胞凋亡。
　　首次建立对白鲜皮中柠檬苦素、黄柏酮、梣酮三种主要成分同时进行含量测定的高效液相色谱方法，并通过测定甲醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙腈5种提取溶剂中三种成分的含量确定最优提取溶剂，结果表明最佳提取溶剂为甲醇。
　　结论:从白鲜皮中分离并鉴定17个化合物，化合物(Ⅰ)及(Ⅱ)为新化合物，化合物(Ⅸ)、(Ⅹ)为首次从白鲜属中分离得到;对人肺癌细胞A549，化合物dictamnin A，dictamnin B均具有较强细胞毒作用，白鲜碱次之，黄柏酮、如忒文、fraxinellonone、柠檬苦素活性较弱，梣酮无活性，化合物dictamnin A、B通过作用于人肺癌细胞A549细胞周期的G1期来抑制细胞的进程，促进其凋亡;建立的高效液相色谱分析方法可简单快速准确的对白鲜皮中三种主要活性成分进行定量测定，并确定从白鲜皮中同时提取这三种主要活性成分的最佳提取溶剂为甲醇。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

第一章 白鲜皮的研究进展

1．1 白鲜皮简介

第二章 白鲜皮化学成分研究

2．1 概述

2．2 白鲜皮化学成分的提取与分离

2．3 白鲜皮化学成分结构鉴定

第三章 白鲜皮化学成分对人肺癌细胞A549增殖及周期的作用

3．1 白鲜皮中8种化学成分对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用

3．2 化合物dictamnin A、B对人肺癌细胞A549细胞周期的影响

第四章 白鲜皮中柠檬苦素、黄柏酮及梣酮的含量测定及提取工艺优选

4．1 实验部分

4．2 实验结果

4．3 结果与分析

结语

参考文献

附录

综述 白鲜属柠檬苦素类化合物及其生物活性的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢