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中药海藻海蒿子(Sargassum Pallidum(Turn.)C.Ag)褐藻糖胶的分离与结构鉴定

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前言

第一章海蒿子褐藻糖胶的提取、分离与纯化

第二章海蒿子褐藻糖胶的结构研究

结语

参考文献

综述褐藻糖胶的结构与生物活性研究

致谢

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摘要

海蒿子(Sargassum Pallidum(Turn.)C.Ag.)是历代本草收录的中药海藻的一种,其性“苦、咸、寒”,归“肝、胃、肾”经,具有“软坚散结,消痰利水”之功效,具有很高的药用价值。复方海藻抗癌制剂是用海藻等传统中药,依据中药组方原则制成的抗肿瘤复方制剂。临床应用显示,该复方可有效配合放疗和化疗治疗肺癌、消化道癌。本文对该复方中君药海藻海蒿子的褐藻糖胶进行分离鉴定,试为海蒿子褐藻糖胶构效关系以及复方物质基础的研究提供参考。以中药海藻海蒿子为原料制备褐藻糖胶,并对不同的提取纯化方法进行比较;经离子交换色谱和凝胶渗透色谱进行分级分离,获得3个褐藻糖胶级分;经理化性质分析和波谱分析,对褐藻糖胶的结构进行了初步表征。采用酸提法和水提法提取海蒿子褐藻糖胶,分别得到粗多糖C1和C2。c1分别经乙醇沉淀法和CaCl<,2>沉淀法纯化得到多糖组分F1和F2;C2同法得到F3和F4。通过对F1~F4的总糖含量和蛋白质含量测定比较各种提取纯化方法。结果表明,对酸提法粗多糖宜采用乙醇分级沉淀法进行纯化,对水提法粗多糖宜采用CaCl<,2>法进行纯化。选取所得组分F4采用Q-Sepharose Fast Flow和Sephadex G-200凝胶柱分级纯化得到3个级分:P1,P2和P3。 通过理化分析(化学组成、分子量)、甲基化和高碘酸氧化分析及波谱分析(GC,GC/MS,HPLC,IR),确定了P1,P2和P3的基本结构特征。P1的分子量为494.4KDa;硫酸基含量为4.78[%];单糖组成为岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖构成,摩尔百分比43.4:33.3:6.2:4.3:12.8;红外光谱显示C-O-S伸缩振动吸收为:820cm<'-1>。P2的分子量为61.5KDa;硫酸基含量为15.34[%];单糖构成为:岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和甘露糖醛酸,其摩尔百分比为: 27.8:12.O:14.9:12.5:29.0:3.8;P2的主链含有1—3连接的Fuc, Man和1→3,4连接的Man;支链含有1→3连接的Fuc;不能确定1→4Xyl位于主链或支链;硫酸基主要位于平伏羟基位置。P3的分子量为167.6KDa;硫酸基含量为18.71%;单糖构成为:岩藻糖、木糖、半乳糖和葡萄糖醛酸,其摩尔百分比为: 49.4:2.4:22.6:25.6;P3的主链含有1→3连接的Fuc,Gal和1→2,3连接的Gal;支链含有1→3连接的Fuc和1→3/1→2,3连接的Gal;不能确定1→4 Xyl位于主链或支链;硫酸基主要位于平伏羟基位置。海蒿子褐藻糖胶的抗肿瘤活性正在测定中。

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