羧甲基壳聚糖合成中特殊杂质的分析及合成路线优化

摘要

羧甲基化是开发利用壳聚糖对其进行化学修饰的方法之一,其产物羧甲基壳聚糖无毒,水溶性优,应用前景广阔。羧甲基壳聚糖的合成,一般采用氯乙酸法。本实验室首次发现,羧甲基壳聚糖中存在一种小分子特殊杂质--二甘醇酸(DGA),具有一定的细胞毒性,对羧甲基壳聚糖的临床应用造成干扰。
　　 本文以羧甲基壳聚糖中特殊杂质--DGA为研究对象,根据其理化性质建立了相应的高效液相检测方法,探讨了杂质DGA的生成原因,并以产物羧甲基度和杂质DGA生成量两项为综合指标,优化了羧甲基壳聚糖的工艺合成路线。
　　 本文建立的二甘醇酸检测色谱条件为:色谱柱:AtlantisC-18(5μm,150mm×4.6mm.ID)柱;流动相:甲醇/10mmol·L-1磷酸二氢钾(pn2.50)=3/97(v/v);流速:0.6mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:λ=204nm;杂质样品提取液:甲醇/水(8/2)。
　　 羧甲基壳聚糖的最终优化合成路线为:反应温度50℃,反应时间3h,壳聚糖与NaOH质量比1:4,NaOH与氯乙酸质量比1:1;羧甲基壳聚糖的合成提纯步骤同步优化。
　　 本文首次发现了羧甲基壳聚糖合成中特殊杂质DGA,建立了相应的专属的HPLC检测方法,优化了羧甲基壳聚糖的合成工艺,为羧甲基壳聚糖的质量控制提供了新的指标与方法学依据,从而为羧甲基壳聚糖的进一步生产应用奠定了良好的基础。

目录

文摘

英文文摘

前言

1 甲壳素、壳聚糖简介

1.1 一般理化性质

1.2 甲壳素、壳聚糖的生物活性

1.3 甲壳素、壳聚糖在医药领域的应用

1.4 甲壳素、壳聚糖的化学改性及应用研究

2 羧甲基壳聚糖

2.1 羧甲基壳聚糖的制备

2.2 羧甲基壳聚糖的应用

3 常用药物中特殊杂质含量测定的分析方法

3.1 光谱法

3.2 色谱法

3.3 热分析法

4 原料药和制剂分析中常用的样品处理方法

4.1 非有机破坏分析方法

4.2 有机破坏分析方法

4.3 用过滤或萃取的手段除去扰

4.4 用固相萃取的手段除去干扰

5 论文思路

第一章 羧甲基壳聚糖中特殊杂质的高效液相分析方法的建立

1 引言

2 实验材料

2.1 药品

2.2 试剂

2.3 仪器

3 特殊杂质的高效液相分析方法的建立

3.1 色谱条件

3.2 样品前处理方法

3.3 标准溶液的制备

3.4 方法学验证

4 结果与讨论

4.1 检测波长的选择

4.2 流动相的选择

4.3 样品前处理方法确定

4.4 方法学验证

4.5 精制前后药品的杂质检测对比

5 本章小结

第二章 羧甲基壳聚糖合成工艺条件优化

1 引言

2 实验材料

2.1 药品与试剂

2.2 仪器

3 羧甲基壳聚糖的制各

3.1 脱乙酰度(DD)的测定

3.2 羧甲基壳聚糖制备步骤

3.3 电位滴定法测定羧甲基度(Ds)

4 正交试验设计

5 结果与讨论

5.1 壳聚糖脱乙酰度的测定

5.2 产物羧甲基度滴定图表征

5.3 反应母液液相色谱图

5.4 空白实验检验

5.5 改变氯乙酸加入方式对结果的影响

5.6 正交试验结果

5.7 由正交试验引发的分段实验设计

5.8 关于样品提纯方式的讨论

6 本章小结

第三章 结论

参考文献

致谢

个人简历