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裙带菜配子体人工无菌培育技术的研究

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0前言

0.1 裙带菜形态学研究概述

0.2 裙带菜人工育苗的意义

0.3 裙带菜配子体的人工采集技术

0.4 国内外研究现状

0.5 本论文研究的内容和意义

1 裙带菜配子体无菌培育相关实验

1.1 裙带菜种带消毒方法的研究

1.2裙带菜配子体的无菌制备

1.3 裙带菜配子体的无菌保种

1.4裙带菜配子体的无菌扩大培养:

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摘要

本课题以裙带菜配子体为研究对象,通过试验几种常用消毒剂对裙带菜种带进行无菌处理,以人工无菌手段制备出无菌裙带配子体,以此得到对裙带菜种带的最佳消毒方法;利用制备出的无菌裙带配子体进行保种培养,得到无菌配子体的最佳保种条件,并对其无菌扩大培养条件进行研究,本研究所用方法和主要取得的研究成果如下:
  1、裙带菜配子体的无菌制备:
  为了寻找裙带菜配子体无菌培育试验中对带有成熟孢子囊的裙带菜种带的最佳消毒方法,使用了双抗海水(含120mg/L青霉素+100mg/L链霉素)、1.5%碘化钾,这2种消毒剂及其不同的时间组合,试验对裙带菜种带块的消毒效果及胚孢子的萌发率。根据本实验结果,最有效的消毒方案为:常规擦洗后,无菌海水冲洗一次,再用双抗海水浸泡20min,然后用1.5%浓度的碘化钾海水溶液浸泡10min,最后用无菌海水浸泡10min,这种消毒效果最佳,且不影响胚孢子的萌发率。
  2、裙带菜配子体的无菌保种:
  根据实验结果,将上述手段处理后制备出的无菌裙带配子体在10℃的光照培养箱内,24小时光照,保持40d的更换培养液周期,试管使用消毒棉塞封口,为配子体的最佳保种条件。
  3、裙带菜配子体的无菌扩大培养:
  利用上述手段获得的无菌裙带配子体,慢慢扩培至100ml锥形瓶内,当生长量至可供实验所需时,进行无菌扩大培养实验。15℃的光照培养箱内,3000lux的光照强度,保持30d的更换培养液周期,500ml锥形瓶使用滤纸膜封口,充气时空气通过微孔滤器过滤,可使配子体增重率保持最大,且维持其干净无菌。
  本论文研究了裙带菜配子体的人工无菌培育技术,探索得到了制备无菌配子体的方法,为后续配子体无菌保种技术,配子体无菌扩大培养技术,新品种培育等工作打下基础,也能为快速繁育优良裙带菜品系提供前期材料和技术储备,对建立裙带菜配子体的无菌培育技术参数体系有一定的指导意义。

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