急性温度胁迫对虹鳟血液成分和关键代谢的影响

摘要

本文以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)幼鱼(体质量为(240±18)g,体长为(25.7±1.7)cm)为对象,研究了急性温度胁迫对虹鳟生长、代谢、免疫以及血液的影响。将虹鳟放入高温24℃和低温6℃水中热应激2h,然后放入16℃水中饲养,检测了血清生理生化成分、血清激素含量以及相关基因mRNA表达量的变化,具体结果如下:
　　1、研究了急性温度胁迫对虹鳟红细胞(RBC)和血红蛋白(Hb)以及血清生化成分含量的影响。结果表明:温度胁迫后,血液RBC和Hb都呈现先降低后升高的趋势,低温组在12h降至最低,高温组在6h降至最低;白细胞在0h有不显著升高,其余时间与对照组没有显著差异;温度胁迫后,两个处理组血糖(GLU)在整个实验过程中都显著低于对照组;总蛋白(TP)和白蛋白(ALP)在温度胁迫后都呈现先降低后升高的趋势,低温组TP在6h达到最低值,ALP在12h达到最低值,高温组TP和ALP都在6h达到最低值;温度胁迫后,两处理组总胆红素(TBIL)和尿素(UREA)都有不显著的升高;温度胁迫后,无机物钙离子(Ca2+)只有高温组在24h显著降低,磷(P)只在胁迫后0h显著升高,其余时间两者没有明显变化。急性温度胁迫对虹鳟血细胞和血清生化组分产生了不同程度影响,且高温组表明更明显。
　　2、研究了急性温度胁迫对虹鳟肥满度(CF)、肝体指数(HSI),血清谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和类胰岛素生长因子(IGF-1)的影响以及肝脏中GH1R、IGF-1和IGF-2表达量的影响。结果显示:温度胁迫后,两处理组CF和HIS没明显变化,说明短时间的温度胁迫对鱼身体指标影响较小。两处理组AST和高温组ALT都呈现先升高后降低的趋势,在6h处达到最大值,而低温组ALT在胁迫后0h就显著升高,随后逐渐降低至对照组水平;两处理组ALP胁迫后都显著降低,并在实验的48h内维持在较低水平。低温组血清IGF-1含量呈现不断上升趋势,并在48h恢复至对照组水平,而高温组血清IGF-1含量在胁迫后始终处于较低水平。两处理组肝脏GH1R的表达量有所降低但差异不显著,而IGF-1和IGF-2表达量都呈现先下降后升高的趋势,并在12h达到最低值,与对照组相比IGF-2的表达量下降更明显。结果表明,温度胁迫后,血清转氨酶活性降低,肝脏受到损伤;血清IGF-1含量下降,肝脏中GH1R、IGF-1和IGF-2表达量也都下降,影响了鱼体的生长。同时高温组个指标变化更明显,说明冷水性鱼虹鳟受高温影响更显著。
　　3、研究了急性温度胁迫对虹鳟血脂、游离甲状腺激素T3(FT3)、游离甲状腺激素T4(FT4)以及肝脏甲状腺激素受体TRα和TRβ表达量的影响。结果显示,急性温度胁迫下总胆固醇(TC)急剧下降,然后逐渐回升,在24h恢复至对照组水平;而甘油三酯(TG)两个温度处理呈现不同变化趋势,高温组无规律的波动而低温组在6h后显著低于对照组并在实验的48h内维持在较低水平。温度胁迫后,FT3在0h和6h时显著低于对照组,12h后逐渐恢复至对照组水平;而FT4仅在0h显著降低,随后迅速恢复至对照组水平。肝脏中TRα和TRβ呈现相同的表达趋势,都是先降低后升高,在6h达到最低值。其中TRβ受温度影响比TRα更大,高温处理组比低温处理组变化更大。结果表明急性温度胁迫影响了血脂的正常代谢,降低了甲状腺的正常功能,对鱼类的生理代谢和生长产生了不利的影响。
　　4、研究了急性温度胁迫对虹鳟免疫细胞白细胞(WBC)和淋巴细胞(LYM)的数量、血清皮质醇含量以及肝脏中GR1、GR2和 MR表达量的影响。结果表明:急性温度胁迫后,虹鳟血液WBC和LYM数量都降低,其中淋巴细胞显著降低。急性温度胁迫后,虹鳟血清皮质醇急剧升高,随后逐渐降低至24h恢复至对照组水平。肝脏GR1、GR2和MR的mRNA表达量也显著升高。其中高温组三个基因都是0h急剧升高随后恢复到对照组水平,而低温组三个基因表达量是先升高后降低,在12h达到最大值。结果表明,急性温度胁迫使虹鳟产生了较强的应激反应,机体的免疫机能下降,影响鱼类的生长发育。

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中英文缩略词表

前言

第一章 文献综述

1 我国虹鳟产业发展

2 温度对鱼类影响研究进展

3 研究目的和意义及研究内容

第二章急性温度胁迫对虹鳟血细胞及血液生化成分的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第三章 急性温度胁迫对虹鳟肝脏代谢与生长调控功能的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第四章 急性温度胁迫对虹鳟血脂含量和甲状腺激素的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第五章 急性温度胁迫对虹鳟皮质醇介导的免疫机能的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

致谢

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