海参及海参岩藻聚糖硫酸酯对小鼠黏膜免疫的调节作用

摘要

化疗药物,如环磷酰胺,是肿瘤治疗中的常用药,具有杀灭肿瘤细胞的功效,但同时会将机体内增殖迅速的正常细胞(如胃肠道、呼吸道黏膜细胞)杀灭,损伤机体黏膜免疫功能。临床上利用药物治疗黏膜免疫损伤存在一定局限性。食源性物质具有多种功效,几乎无毒性,且直接接触消化道黏膜起作用,因而成为黏膜免疫保护物质的首选。海参是一种珍贵的海洋生物资源,具有悠久的研究历史。海参中含有海参多糖、皂苷、活性肽、磷脂等多种生物活性物质,被证实具有多种生理活性,如提高机体免疫力、抗肿瘤、抗凝血、改善脂质代谢等。本文的主要研究目的是探讨海参及海参活性物质之一(海参岩藻聚糖硫酸酯)对环磷酰胺所致黏膜免疫损伤的保护作用,为完善海参营养评价体系提供技术支撑,并为开发以海参多糖为功效因子的功能性食品提供理论依据,促进海洋生物资源的深度开发利用。
　　本论文主要包括三部分内容:
　　第一部分:研究四种常见海参对小鼠肠道黏膜免疫的调节作用。采用环磷酰胺诱导肠道黏膜免疫损伤动物模型,分别灌胃仿刺参、梅花参、美国肉参、海地瓜进行实验。通过检测肠道黏膜免疫相关指标对海参的肠道黏膜免疫调节作用进行评价。研究结果显示,环磷酰胺对小鼠肠道黏膜免疫功能造成明显损伤,而海参的前期摄入可以起到改善作用,具体表现包括:增加免疫器官指数,提高机体整体免疫水平;提高绒毛长度及绒毛长度/隐窝深度(V/C)值,恢复小肠组织正常结构形态及综合功能状态;调节免疫细胞因子IFN-γ及IL-4的分泌,改善黏膜Th1/Th2平衡状态,维持黏膜免疫平衡;促进肠道黏膜免疫效应因子SIgA分泌,增强肠道黏膜免疫功能。此外,四种海参中以仿刺参和梅花参的作用效果较为明显,提示与其较高的多糖含量相关。
　　第二部分:研究食用海参对小鼠呼吸道黏膜免疫的调节作用。参照人体食用海参的方式及剂量进行实验研究。采用环磷酰胺制备呼吸道黏膜免疫损伤动物模型,检测呼吸道黏膜固有免疫及获得性免疫因子变化情况,并初步探讨机理。结果显示,食用海参能够改善环磷酰胺造成的呼吸道黏膜免疫损伤,具体表现为:明显改善环磷酰胺诱导的溶解酶表达量下降,提高固有免疫作用;有效促进支气管肺泡中的SIgA含量,改善获得性免疫功能。进一步研究表明,海参的前期摄入可以通过促进呼吸系统中IgA与pIgR的高表达,从而提高呼吸道SIgA的分泌水平,达到改善呼吸道黏膜免疫功能的作用。
　　第三部分:研究海参岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物对小鼠肠道黏膜免疫的调节作用。首先,检测肠道黏膜免疫相关指标,对海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)及酶解产物的肠道黏膜免疫调节作用进行评价。结果显示,SC-FUC及酶解产物可以通过提高免疫器官指数;恢复小肠组织形态及综合功能状态;调节免疫细胞因子分泌,维持黏膜免疫平衡;促进肠道黏膜免疫抗体IgA高表达来增强肠道黏膜免疫功能。其次,针对不同分子量SC-FUC的作用效果差异,探讨其与海参多糖消化吸收效率之间的关系。结果显示,SC-FUC分子量越低,在实验动物体内的消化吸收效果越好。因此推测不同分子量SC-FUC的作用效果差异可能与其消化吸收效率相关。最后,对SC-FUC促进肠道IgA高表达的机理进行探究。研究发现,SC-FUC能够促进巨噬细胞免疫调节作用,并通过促进巨噬细胞 Toll样受体(TLRs)高表达,激活NF-κB信号通路,刺激细胞因子IL-6,IL-10表达量升高,从而增加肠道IgA表达水平,提高肠道黏膜免疫功能。
　　综上所述,海参及海参岩藻聚糖硫酸酯能够对环磷酰胺造成的小鼠黏膜免疫功能损伤起到改善作用。其中,海参以多糖含量较高的海参品种(仿刺参和梅花参)效果较好,海参岩藻聚糖硫酸酯以酶解成恰当低分子量(50KDa-500KDa)片段的多糖作用效果为佳。该研究为海参及海参多糖的深入开发利用提供了理论依据。

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前言

第一章 四种常见海参对小鼠肠道黏膜免疫的调节作用

1引言

2材料和试剂

3实验方法

4实验结果与讨论

5本章小结

第二章 食用海参对小鼠呼吸道黏膜免疫的调节作用1引言

2材料和试剂

3实验方法

4实验结果与讨论

5本章小结

第三章 海参岩藻聚糖硫酸酯及酶解产物对小鼠肠道黏膜免疫的调节作用及机理

第一节 不同分子量海参岩藻聚糖硫酸酯对小鼠肠道黏膜免疫的调节作用

第二节 海参岩藻聚糖硫酸酯促进小肠IgA表达量增高的机理

结论

1总结

2本论文创新点

参考文献

致谢

个人简历

硕士就读期间发表的论文