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【6h】

祛瘀解毒法对血瘀蕴毒型子宫内膜异位症卵泡液及颗粒细胞TNF-α、IL-6的研究

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目录

提要

Abstract

引言

文献研究

一、现代医学对子宫内膜异位症不孕的研究进展

(一) 现代医学对子宫内膜异位症致不孕病因认识

(二) 现代医学对子宫内膜异位症致不孕治疗认识

二、中医学对子宫内膜异位症不孕的研究进展

(一) 中医对子宫内膜异位症病因病机认识

(二) 中医对子宫内膜异位症不孕治疗认识

临床研究

技术路线图

一、研究对象

(一) 病例来源

(二) 诊断标准

(三) 病例选择标准

(四) 症状分级量化评分标准

(五) 观察项目

二、研究方法

(一) 临床分组

(二) 药物、实验室设备及培养液

(三) 用药方法

(四) 标本的收集

(五) 颗粒细胞TNF-Α、IL-6MRNA 表达量的定量测定

(六) 统计学分析

三、一般资料

(一) 治疗组、对照组及空白组患者年龄(岁)分布比较(见表3)

(二) 治疗组与对照组患者病程(年)比较(见表4)

(三) 治疗组与对照组孕产史分布比较(见表5)

(四) 治疗组与对照组患者治疗前血瘀蕴毒证候积分比较(见表6)

(五) 治疗组与对照组治疗前基础内分泌的比较(见表7)

四、研究结果

(一) 治疗组与对照组患者治疗前后血瘀蕴毒证候积分变化比较(见表8)

(二) 治疗组与对照组妊娠率的比较(见表9)

(三) 治疗组与对照组氯米芬结合IUI 妊娠率的比较(见表10)

(四) 治疗组、对照组及空白组IVF 控制超促排卵结果(见表11)

(五) 治疗组与对照组治疗前后黄体期内分泌指标比较(表12)

(六) 治疗组与对照组治疗前后外周血EMAB 效价比较(表13)

(七) 治疗组与对照组治疗前后血清CA125、TNF-Α、IL-6 含量的比较(表14)

(八) 治疗组、对照组及空白组卵泡液TNF-Α、IL-6 的比较(表15)

(九) 治疗组、对照组及空白组颗粒细胞TNF-ΑMRNA、IL-6MRNA 表达的比较(表 16)

五、讨论

(一) 血瘀蕴毒病机的建立与子宫内膜异位症的关系

(二) 祛瘀解毒颗粒组成与应用基础

(三) 研究结果分析

实验研究

技术路线图

实验一 祛瘀解毒颗粒对子宫内膜异位症模型大鼠卵巢颗粒细胞TNF-ΑMRNA、 IL-6MRNA 表达的影响

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

实验二 子宫内膜异位症患者卵泡液对小鼠胚胎发育影响的研究

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

结语

参考文献

附录

致谢

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摘要

目的:观察祛瘀解毒颗粒结合辅助生殖技术(ART)治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症不孕的疗效并探讨其作用机理,试图开辟中医药治疗EM不孕的新思路,为临床有效治疗该病提供依据。方法:临床研究:60例子宫内膜异位症(EM)不孕患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组有20例口服祛瘀解毒颗粒结合氯米芬(CC)促排卵+宫腔内人工授精(IUI);另外10例口服祛瘀解毒颗粒同时行IVF-ET。对照组有20例单纯给CC促排卵+IUI,另外10例行IVF-ET。观察治疗前后血瘀蕴毒证候积分变化、妊娠率、免疫及内分泌学相关指标、血清和卵泡液TNF-α、IL-6含量以及卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达情况。实验研究一:40例EM模型大鼠随机分为试验组、观察组各20例,另取20只大鼠只牵拉子宫作为空白组。试验组每天给予祛瘀解毒颗粒溶于2ml生理盐水灌胃,观察组和空白组均给予2ml生理盐水,连续灌胃3周。末次给药后24h各组大鼠均给予人绝经后促性腺激素(HMG)50IU腹腔注射,48h后给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)100IU/100g,14~16h后处死大鼠收集卵细胞及颗粒细胞团,观察优质卵细胞数目及优质卵细胞率,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达。实验研究二:配制不同的培养液,对20只小鼠超排卵共收集189枚2-细胞鼠胚分别放入各组培养液进行培养。其中治疗组培养液为P-1胚胎培养液加10%SSS加10%治疗组EM患者卵泡液;对照组为培养液P-1胚胎培养液加10%SSS加10%对照组EM患者卵泡液;空白组培养液为P-1胚胎培养液加10%SSS加10%空白组人卵泡液。每日在显微镜下观察小鼠胚胎情况。结果:1.祛瘀解毒颗粒能够有效改善患者血瘀蕴毒证候,提高妊娠率,降低EMAb的阳性率及CA125水平,改善内分泌状态,降低患者血清及卵泡液TNF-α、IL-6的含量,降低卵巢颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表达,效果明显优于对照组(P<0.05)。2.试验组大鼠优质卵细胞数目、优质卵细胞率明显高于观察组(P<0.05),颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达明显低于观察组(P<0.05)。3.小鼠2-细胞胚胎在治疗组及空白组培养液中发育到8-细胞期、桑葚胚及囊胚及优质胚胎的比率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:祛瘀解毒颗粒可以改善血瘀蕴毒症候,提高EM不孕患者妊娠率,是治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症的有效药物。推测其作用机理可能与调节免疫功能,改善内分泌状态,降低卵泡液TNF-α、IL-6水平及颗粒细胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达等有关,通过旁分泌或(和)自分泌方式直接或间接参与卵巢功能的局部调节,改善卵子生存的内环境,提高卵细胞质量,减少对胚胎的毒性作用,从而提高EM患者妊娠率。

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