纳米雄黄对皮肤鳞癌A431细胞株抑制增殖及抑制新生血管作用的实验研究

摘要

目的:对皮肤肿瘤进行中医文献复习,并通过检测人皮肤鳞癌A431细胞用纳米雄黄处理后细胞增殖抑制及血管生长调控因子表达情况,探讨纳米雄黄抑制血管生长抗肿瘤的作用机理。方法:查询并复习中医文献资料,对皮肤鳞癌A431细胞进行体外培养,按实验分组加药后观察其形态及生长状况变化,并分别用MTT法、免疫组织化学法和RT-PCR法检测加药后细胞增殖抑制、色素上皮源性因子(PEDF)和VEGFmRNA表达情况,探讨纳米雄黄抑制皮肤鳞癌新生血管生成的作用机理。结果:纳米雄黄可以抑制人皮肤鳞癌A431细胞增殖,且与顺铂联合应用有协同作用,并发现纳米雄黄抑制A431细胞增殖的作用与上调PEDF的表达和下调VEGF的表达以抑制新生血管生成有关。结论:体外实验表明纳米雄黄可显著抑制人皮肤鳞癌A431细胞增殖,并通过抑制其新生血管生成达到抗肿瘤细胞生长的效果,与顺铂有协同作用。

目录

提要

Abstract

引言

第一部分 实验研究

一 实验方法和结果

（一） 一般材料与纳米雄黄的制备

（二） 细胞培养

（三） 纳米雄黄对皮肤鳞癌 A431 细胞形态学和生长状况的影响

（四） MTT 法测定纳米雄黄对 A431 细胞的增殖抑制率

（五） 免疫组织化学法检测纳米雄黄处理后皮肤鳞癌 A431 细胞 PEDF 基因的表达情况

（六） RT-PCR 法提取 RNA 检测纳米雄黄处理后皮肤鳞癌 A431 细胞株 VEGF 的转录MRNA 情况

二 统计分析方法

第二部分 病例个案分析

一 结合应用纳米雄黄情况介绍患者病情

（一） 个案一

（二） 个案二

二 疗效分析

讨论

一 中医文献综述

（一） 概述

（二） 病因病机

（三） 辨证论治

二 中药雄黄的主治功效及其抗肿瘤作用的临床应用

（一） 治疗恶性血液病

（二） 治疗实体瘤

三 皮肤鳞癌病因及机制研究

（一） 紫外线

（二） 人类乳头瘤病毒

（三） 放射线照射

（四） 化学物质刺激

（五） 其它物理刺激

（六） 继发于慢性皮肤病变

（七） 遗传因素

四 皮肤鳞癌与凋亡及新生血管生成相关因子的研究

（一） SURVIVIN

（二） CASPASE 家族

（三） 血管内皮生长因子(VEGF)

（四） 色素上皮细胞衍生因子(PEDF)

（五） 环氧合酶-2(EYELOOXYGENASE-2，COX-2)

五 皮肤鳞癌的现代治疗进展

（一） 手术治疗

（二） 放疗

（三） 光动力疗法

（四） 药物治疗

（五） 基因治疗

（六） 中医药治疗

六 中药抗肿瘤血管生成作用机制的研究进展

七 纳米雄黄的制备及其药理药代动力学研究

八 实验结果分析

结语

参考文献

综述

参考文献

附录

致谢