基因枪介导的玉米自交系齐319遗传转化体系的建立

摘要

作为一种重要的粮食作物,玉米的遗传育种工作一直是植物遗传育种工程的重要方面.利用遗传工程育种提高玉米的产量和品质是育种工作者长期以来奋斗的目标.玉米的育种工作长期以来一直以株系间的杂交为主,进展缓慢.随着植物分子生物技术的发展,研究者们可以直接将有益基因导入受体细胞,由转化细胞再生出带有优良性状的植株.但是现代分子生物学实验技术对于植物的离体再生能力要求很高,这一点对于单子叶植物来说相对比较困难.所以玉米的组织培养工作一直以来是育种工作者关注的热点.玉米组织细胞的再生能力在很大程度上依赖于玉米的基因型,到目前为止,仍然没有得到一套较理想的组培体系.许多遗传工程研究人员在努力探索建立一套具有普遍适用性的玉米组培系统.该研究以华北地区玉米骨干自交系齐319为材料,以幼胚为受体,以基因枪轰击方法将Bt基因导入受体细胞.在5mg/Lbasta选择压力下,经过一个半月的筛选,获得了具有除草剂抗性的愈伤组织.抗性愈伤组织在分化培养基上诱导出45株再生植株,随机抽取了8株,经PCR分析,6株得到Bt基因目标带.经Southern杂交分析,三株整合有Bt基因.实验表明,在诱导培养基上添加0.5mg/L6-BA能显著提高愈伤组织的分化频率;金粉用量以每枪500μg为佳;以0.5M甘露醇将幼胚在轰击前进行渗透处理可以显著提高抗性克隆的数目.

目录

一、论文综述

1.前言

2.转基因玉米的受体系统

3.玉米的转基因技术

4.玉米转基因植株的筛选和瞬时检测

5.外源基因的整合及其在子代中的分离

6.外源基因的表达

7.玉米转基因研究的问题与展望

二、研究论文

1.实验材料、培养基及缓冲液

2.实验方法

3.结果及分析

4.讨论

5.图版及说明

三、参考文献

四、致谢