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高原鼢鼠Prestin基因结构及其组织特异性表达

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第一章 引言

1.1 地下鼠及其洞道环境特征

1.2 地下鼠对低氧高二氧化碳环境的适应

1.3 高原鼢鼠和高原鼠兔简介

1.4 地下鼠的空间定位方式

1.5 Prestin基因的发现,结构特征,组织的特异性表达,主要功能,作用机制,应用展望

1.6 本论文的主要科学问题,研究内容,目的及意义简介

第二章 实验方法

2.1 实验材料

2.2 高原鼢鼠Prestin基因的克隆和序列分析

2.3 高原鼢鼠Prestin基因选择压力分析

2.4 Prestin基因在高原鼢鼠尾巴,足垫,鼻垫等组织中的筛选

2.5 Prestin基因mRNA表达水平荧光定量 PCR(Real-time PCR)的测定

2.6 数据统计分析

第三章 实验结果

3.1 高原鼢鼠Prestin基因的克隆和序列分析

3.2 高原鼢鼠Prestin基因选择压力分析结果

3.3 Prestin基因在高原鼢鼠尾巴,足垫,鼻垫等组织中的筛选结果

3.4 Prestin基因mRNA水平的表达量

讨论

全文总结

参考文献

致谢

作者简历

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摘要

高原鼢鼠(Myospalax baileyi)是青藏高原特有的地下鼠,地下鼠准确的空间定位能力,prestin蛋白是在耳蜗特异性表达且与回声定位有关的蛋白分子。为了探讨Prestin基因与高原鼢鼠地下空间定位之间的关系,我们克隆了高原鼢鼠Prestin基因的编码区序列,并与其他物种的Prestin基因序列进行序列比对;运用分支位点模型(“test2”)对高原鼢鼠的Prestin基因进行进化分析;根据已克隆的序列设计特异性引物在高原鼢鼠尾巴、足垫和鼻垫等组织中进行筛选;应用荧光定量PCR方法测定高原鼢鼠耳蜗、尾巴、足垫和鼻垫组织中Prestin基因mRNA表达水平。研究结果表明,与人、大鼠、小鼠、裸鼢鼠、家兔和牛6种哺乳类动物相比,高原鼢鼠Prestin基因编码的氨基酸序列显示存在9个氨基酸残基突变;Test2模型未检测到统计上显著的正选择位点;高原鼢鼠耳蜗Prestin基因mRNA的表达水平显著高于高原鼠兔(P<0.05),高原鼢鼠耳蜗和尾巴Prestin基因mRNA的表达水平显著高于足垫和鼻垫(P<0.01)。以上结果说明,Prestin基因不仅在高原鼢鼠耳蜗中表达,而且在尾巴、足垫和鼻垫组织中也有表达。高原鼢鼠在地下洞道生活过程中,可能利用尾巴、前后足和鼻子辅助感知低频声波,从而准确地进行空间定位。

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