藏雪莲多糖减轻UVB辐射后HaCaT细胞氧化损伤的实验研究

摘要

目的:研究藏雪莲植物多糖是否能对体外UVB（Ultraviolet b，中波紫外线）诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)的氧化损伤起保护作用。
　　方法:应用体外培养的细胞实验模型培养人永生化表皮（HaCaT细胞），按照辐射能量不同，分为高辐射组，低辐射组。应用提纯后不同浓度的藏雪莲多糖对辐射细胞进行干预，分为对照组（正常培养，无辐射，无多糖）、辐射组（辐射，无多糖）、低浓度臧雪莲多糖组、高浓度臧雪莲多糖组。多糖提前1h添加。照射后各组细胞培养18h。应用台盼蓝染色法对辐射后各组细胞形态与凋亡状况观察并摄片，应用MTS法测细胞增殖；抗氧化酶测定：酶标法测GSH（谷胱甘肽）含量，TBA法测定MDA（细胞丙二醛）含量，可见光法测定CAT（过氧化氢酶）及WST-1法测定SOD（超氧化物歧化酶）活力。
　　结果:与辐射组相比，给予不同浓度的藏雪莲多糖后，蓝染数下降，细胞结构完整性上升，减少细胞的死亡率；增殖活性提高；降低 MDA含量，使GSH含量、SOD及CAT活性上升，与辐射组比较均具有统计学差异（P＜0.05）。
　　结论:经过不同能量UVB辐射后的HaCaT细胞在给予一定剂量的藏雪莲多糖形后，可有效减轻光损伤造成的细胞结构破坏，减少细胞凋亡。

目录

声明

主要符号对照表

第1章 引言

第2章 材料和方法

2.1 实验材料

2.1.1 主要对象

2.1.2 主要仪器

2.2 实验溶液和试剂配制

2.2.1 藏雪莲多糖的提取

2.2.2 MDA、GSH、CAT、SOD测定配液

2.3 实验方法

2.3.1 HaCaT细胞的培养

2.3.2 实验分组

2.3.3 台盼蓝染色

2.3.4 MTS法检测细胞增殖

2.3.5 MDA、GSH、CAT、SOD测定

2.4 统计学方法

2.5 技术路线

第3章 结果

3.1 台盼蓝染色

3.2 MTS法

3.3 MDA、GSH、CAT、MDA测定

第4章 讨论

4.1 研究的基础现状

4.2 未来展望

第5章 结论

参考文献

致谢

附录A 综述:藏雪莲成分及研究现状

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