甘珀酸钠苦参素包合物中枢抑制作用及相关机制研究

摘要

目的： 观察甘珀酸钠苦参素包合物（Oxymatrine-carbenoxolone sodium inclusioncompound，OCSIC）的中枢抑制作用并初步探讨其中枢抑制作用相关机制。 方法： 采用行为药理学方法观察OCSIC 对阈剂量和阈下剂量戊巴比妥钠（Pentobarbital，PENT）催眠作用的影响、对小鼠主动和被动活动的协调能力及耐力的影响。采用GABA合成和释放抑制剂、γ-氨基丁酸（Gamma aminobutyric acid，GABA）、GABA 受体激动剂和拮抗剂、GABA转运体1（GABA transporter-1，GAT-1）抑制剂等相关工具药研究OCSIC的中枢抑制作用并分析其作用机制。采用免疫组织化学方法（SABC 法），测定OCSIC 对小鼠大脑皮质、海马和脑干网状结构中GAT-1和PKC-Υ免疫阳性神经细胞的影响，分析OCSIC中枢抑制作用与脑GAT-1、PKC-Υ的关系。 结果： 1. OCSIC100、50和25 mg/kg均能引起小鼠自主活动减少（P<0.01），抑制率分别为86.7％，85.6％，17.2％；使PENT入睡潜伏期分别缩短61.2％，49.0％，36.7％（P<0.01），而睡眠持续时间分别延长379.8％，146.2％，132.2％（P<0.01,P<0.05），并能明显加强阈下剂量PENT的催眠作用（P<0.05）。提示OCSIC具有明显中枢抑制作用。 2. OCSIC100 mg/kg 能对抗GABA 合成和释放抑制剂3- 巯基丙酸（3-Mercaptopropionic acid，3-MP）所致惊厥作用（P<0.01），惊厥潜伏期由2.8±0.44 s提高到7.6±1.34 s（P<0.01）；阈下剂量OCSIC与阈下剂量GABA或3-哌啶甲酸乙酯（Ethylnipecotate，EN）合用均能协同减少小鼠自主活动，自主活动率分别下降78.78％和47.04％（P<0.01）；OCSIC100 mg/kg可使小鼠大脑皮质、海马和脑干网状结构中GAT-1免疫阳性神经细胞数目减少(P<0.01)。提示OCSIC的中枢抑制作用与GABA能神经递质有关，通过增加GABA的合成和释放，减少GABA转运发挥作用。 3. 阈下剂量OCSIC与阈下剂量蝇蕈醇（Muscimol，MUS）或巴氯芬（Baclofen，BAC）合用均能协同减少小鼠自主活动，自主活动率分别下降57.69％和19.12％（P<0.01）；OCSIC100 mg/kg与阈下抗惊厥剂量安定(Diazepam，DZ)合用能对抗荷包牡丹碱（Bicuculine，BIC）和印防己毒素（Picrotoxin，PTX）致惊厥作用（P<0.01），但不能对抗海人藻酸（kainic acid，KA）、NMDA致惊厥作用。提示OCSIC的中枢抑制作用与激活GABA能神经受体有关，与KA、NMDA受体无直接关系。 4. OCSIC100 mg/kg可使小鼠大脑皮质、海马和脑干网状结构中PKC-Υ免疫阳性神经细胞数目减少(P<0.01)。提示OCSIC的中枢抑制作用与PKC-Υ有关。 结论： OCSIC具有明显的中枢抑制作用，其作用部位涉及大脑皮层、海马和脑干网状上行系统，OCSIC中枢抑制作用机制可能与GABA能神经递质有关，通过增加GABA的合成和释放，减少GABA转运发挥作用，其机制还与激动GABA 受体、减少大脑皮质、海马和脑干网状结构中GAT-1、PKC-Υ表达有关。