苦参碱对BCG加LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用

摘要

苦参碱是豆科植物苦豆子S.alopecuroides L，苦参Sophora flavescens Ait，广豆根S.Subprostrata Chun et T.Chen等中草药的活性成分，具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗心律失常、降血脂、平喘等多种药理作用，因此可作为药用植物资源进行开发和利用。由于苦参碱抗炎作用的机制尚未完全阐明，为此，本课题以小鼠免疫性肝损伤为模型，研究苦参碱对BCG加LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其作用机制。 第一部分、苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能及免疫器官的影响 目的：观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能、免疫器官系数的影响。 方法：BALB/c雄性小鼠60只，随机分为六组，分别是：正常对照组，模型组，联苯双酯组，苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型，正常对照组与模型组给予生理盐水，阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯，药物处理组分别给予20mg/kg，40mg/kg，80mg/kg苦参碱。除正常对照组外，其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗，第2天起，各给药组以0.1ml/10g灌胃给药，每天1次，连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击，禁食12h。分别观察不同剂量的苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠免疫器官系数的影响。 结果：模型组小鼠ALT、AST及免疫器官系数明显升高，与正常对照组相比，差异均具有统计学意义；与模型组相比，苦参碱能够显著降低免疫性肝损伤小鼠ALT、AST及免疫器官系数。 结论：苦参碱可降低BCG加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠的ALT、AST及免疫器官系数。 第二部分、苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠抗氧化能力的影响 目的：探讨苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）及丙二醛（MDA）含量的影响。 方法：BALB/c雄性小鼠60只，随机分为六组，分别是：正常对照组，模型组，联苯双酯组，苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型，正常对照组与模型组给予生理盐水，阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯，药物处理组分别给予20mg/kg，40mg/kg，80mg/kg苦参碱。除正常对照组外，其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗，第2天起，各给药组以0.1ml/10g灌胃给药，每天1次，连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击，禁食12h。摘取小鼠肝脏，制成10％的肝匀浆，用GSH-Px、T-AOC、MDA检测试剂盒分别检测小鼠肝匀浆中GSH-Px活性、T-AOC及MDA含量。 结果：模型组小鼠肝匀浆中MDA含量升高，GSH-Px活性和T-AOC含量降低，与正常对照组相比，差异均具有统计学意义；与模型组相比，苦参碱能够降低BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中MDA含量，提高GSH-Px活性和T-AOC含量。 结论：苦参碱的抗炎作用与其提高小鼠体内抗氧化物质的活力有关。 第三部分、苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质的影响 目的：观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1β）、一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）含量的影响。 方法：BALB/c雄性小鼠60只，随机分为六组，分别是：正常对照组，模型组，联苯双酯组，苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型，正常对照组与模型组给予生理盐水，阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯，药物处理组分别给予20mg/kg，40mg/kg，80mg/kg苦参碱。除正常对照组外，其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗，第2天起，各给药组以0.1ml/10g灌胃给药，每天1次，连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击，禁食12h。摘取小鼠肝脏，制成10％的肝匀浆，用放射免疫方法检测小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β的含量；用NO、iNOS检测试剂盒检测小鼠肝匀浆中NO、iNOS含量。 结果：模型组小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量升高，与正常对照组相比，差异均具有统计学意义；与模型组相比，苦参碱能够降低免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量。 结论：苦参碱的抗炎作用可能与下调致炎因子（TNF-α、IL-1β、NO、iNOS），抑制致炎效应有关。