HBV C1653T位点突变、A1762T/G1764A双位点突变与肝细胞癌关系的研究

摘要

目的：探讨HBVC1653T点突变、1762T/G1764A双位点突变与肝细胞癌发生的关系。
　　方法：1、收集2009年1月—2010年5月在宁夏回族自治区五家医院住院的88例HBV相关肝细胞癌（HCC）患者和104例慢性乙肝（CHB）患者血清和一般病例资料。采用巢式PCR扩增目的基因片段（nt1606-2606）并直接测序，测序结果用ChromaS软件与Genbank上登记的标准序列比较，分析慢性乙肝组和肝细胞癌组HBVC1653T位点、A1762T/G1764A双位点突变情况；HBV标志物和HBVDNA定量分别采用酶联免疫法吸附法（ELISA）和PCR荧光探针法（PCR-FQ）检测。2、分析HBVC1653T点突变、1762T/G1764A双突变与HBVDNA和e抗原的关系。3、采用多因素LogistiC回归分析年龄、e抗原、伴有肝硬化、HBVDNA、HBVC1653T点突变、1762T/G1764A双位点突与肝细胞癌的发生是否相关，P<0.05为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1、C1653T点突变率在肝细胞癌组和慢性乙肝组中分别为35.25％（31/88）和12.5%（13/104），肝细胞癌组明显高于慢性乙肝组（P=0.00）。
　　2、A1762T/G1764A双位点突变率在肝细胞癌组和慢性乙肝组中分别为67.05%（59/88）和49.04%（51/104），肝细胞癌组明显高于慢性乙肝组（P=0.00）。
　　3、C1653T点突变患者组与无突变患者组HBVDNA定量值比较没有统计学差异性(5.446±1.075copies/mLVs5.821±1.163copies/mL，P=0.068)；A1762T/G1764A双突变患者HBVDNA定量值明显高于无突变患者，差异有统计学意义(6.135±1.186copies/mLVs5.034±1.432copies/mL，P=0.00)。
　　4、HBeAg阴性组中C1653T位点的突变率明显高于HBeAg阳性组(32.71%Vs10.59%，P=0.00)；HBeAg阴性组A1762T/G1764A双位点突变率明显高于HBeAg阳性组(69.16%Vs42.46%，P=0.00)。
　　5、多因素LogistiC回归分析提示C1653T点突变、A1762T/G1764A双突变是肝细胞癌发生的危险因素（P=0.001,OR=4.686；P=0.007，OR=2.848）。
　　结论：
　　1、HCC组HBVC1653T位点突变率显著高于CHB组，多因素logistic回归分析该位点突变是肝癌发生的危险因素，这一结果或许可作为HBV感染者临床结局的可预测性分子标记。
　　2、HCC组HBVA1762T/G1764A双位点突变率显著高于CHB组，多因素logistic回归分析BCP区双位点突变是肝细胞癌发生的危险因素，该结果或许可作为HBV感染者发展为肝癌的早期预警信号
　　3、HBVC1653T位点突变对HBV的复制可能没有影响；HBVA1762T/G1764A双突变可能提高了HBV的复制能力。
　　4、HBVC1653T位点突变、A1762T/G1764A双位点突变可能抑制HBeAg的表达。

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前 言

材料与方法

1. 研究对象

1、用酶联免疫吸附实验

2、采用PCR荧光探针法检

3. 采用巢式 PCR

结 果

1、慢性乙肝组和肝细胞癌组一般资料比较。

2、慢性乙肝组和肝细胞癌组HBV DNA定量值比较

4 、慢性乙肝组和肝细胞癌组中HBV BCP区A1762T/G1764A双位点突变情况

5、C1653T突变及A1762T/G1764A双突变与HBV DNA的关系

6、C1653T突变、A1762T/G1764A双突变与HBeAg的关系

7、肝细胞癌发生危险因素的统计学分析

讨 论

1、 HBV 增强子ⅡC1653T位点突变与肝细胞癌的关系

2. HBV BCP区A1762T/G1764A双位点突变与肝细胞癌的关系

3、 C1653T位点突变、A1762T/G1764A双位点突变HBV DNA的关系

4、C1653T位点突变、A1762T/G1764A双位点联合突变与HBeAg之间的关系

5、多因素LogistiC回归分析肝细胞癌发生的危险因素

结 论

参考文献

综述

致谢

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