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黄瓜立枯病拮抗木霉菌筛选及主要生防机理研究

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引言

第一章拮抗立枯丝核菌的木霉菌菌株的筛选

第二章T05-049的生物学特性

第三章T05-049防治黄瓜立枯病的主要拮抗机制

全文小结

参考文献:

致谢

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附图:

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摘要

本研究将采自山东、广东、广西、北京、甘肃、云南、越南等7个省份的土样,通过平板稀释法,分离出323株木霉菌菌株;通过对峙培养、耐性测定和防治效果的比较,筛选出一株优良木霉菌,定名为T05-049;根据在MA培养基上的培养性状和分子孢子梗、小瓶梗及孢子的特征,初步鉴定为拟康氏木霉。 试验中测定了T05-049的基础生物学特性。通过正交试验L934,确定该菌株生长的最优培养基配方为:麦芽糖18g、蛋白胨6g、KH2PO41g、KNO31g、VB20.2g,琼脂20g;在最优培养基上生长时,可以生长的温度范围为5~35℃,适合菌丝生长、产孢和孢子萌发的温度范围为15~30℃,最适温度是25~30℃;pH值范围为4~11,最适pH为5、6;光照与菌丝生长无关,但有利于产孢。 室内盆栽试验,研究了T05-049对黄瓜苗期立枯病的防治机理。该菌株具有较强的空间、营养竞争和重寄生能力,其菌丝可以缠绕、穿插、紧贴等方式寄生于立枯丝核菌R15菌丝上,最终使菌丝断裂、解体直至死亡。该菌株能够极快地在黄瓜苗根部定殖,同时抑制R15的定殖,说明该菌株是在抑制病原菌生长的基础上防治立枯病的。 T05-049能够产生挥发性和非挥发性抗生物质来抑制R15的生长,其中起主要作用的是非挥发性抗生物质。其挥发性抗生物质的抑菌率仅为23.5%,其非挥发性抗生物质含量为0.1%时其抑菌率就达61.3%。 T05-049能够诱导黄瓜苗POD、CAT等抗氧化酶活性的提高,增加可溶性蛋白的含量,减少MDA的含量,从而减少活性氧对黄瓜苗造成的伤害,增强黄瓜苗的抗病性。该菌株诱导黄瓜苗产生抗病性的特点,在苗期更为显著。 T05-049在黄瓜苗根部的施入,使根际真菌、放线菌和优势细菌的数量明显减少(同时也促进了个别菌种数量的增加),数量明显减少的多为病原菌。通过对峙培养,进一步证明了该菌株具有较广的抑制病原菌的能力。 T05-049和其它木霉菌种间有或无协同作用,说明木霉菌间的协同作用具有种间的差异。该菌株和多菌灵之间具有协同作用,不仅能增强防治效果,还能够减少药剂的施用量。 T05-049能够明显的促进黄瓜苗的生长,具有防病促生作用,使植株粗壮、叶面积增大、叶片增厚、叶绿素含量增加、光合作用增强。其原因是多方面的,如培养木霉菌的麸皮培养基或该菌株在抑制病原菌的过程中产生的一些物质,或诱导黄瓜苗本身抗病性的增强,或根际微生物结构的变化,都可能对植株生长产生影响。表明该菌株促进黄瓜苗的生长是多种机理协同作用的结果。 本论文进行了木霉菌株的筛选,并进一步研究了其基础生物学特性和拮抗机理等。对该木霉菌各种特性的研究,有利于该菌株在农业和商品化生产上的应用。

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