家蚕蛹油降解细菌的分离、鉴定及降解能力测定

摘要

利用平板稀释培养法对缫丝废水处理池中的细菌进行了分离,通过紫外分光光度法对其降解家蚕蛹油的能力进行了测定。采用细菌基因组重复序列PCR技术(rep-PCR),对家蚕蛹油降解细菌进行了聚类分析。采用菌落形态、生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析对家蚕蛹油降解细菌进行了鉴定。选用Shannom-Wiener指数(H')、丰富度指数(S)、Pielou均匀度指数(J)和Simpson优势度指数(D),对家蚕蛹油降解细菌的生物多样性进行了分析。主要结果如下。 从缫丝废水处理池中共分离得到57个对家蚕蛹油具有降解能力的细菌分离物。降解能力超过50％的细菌分离物有12个,其中H73、H23、H1、H5和H43在72h内对家蚕蛹油的降解率分别达到76.36％、62.04％、60.58％、53.85％和51.20％。 家蚕蛹油降解细菌rep-PCR基因指纹分析图显示,57个家蚕蛹油降解细菌被分为44个聚类群。 细菌鉴定结果表明,44个聚类群中的39个聚类群属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.),1个聚类群为微杆菌属(Microbacterium sp.),2个聚类群为肠杆菌属(Enterobacter sp.),另外2个聚类群尚未获得其16S rDNA序列,有待进一步鉴定。各菌株的16S rDNA序列已在GenBank上注册。其中,芽孢杆菌属的细菌数量为1.4473×106CFU/mL,大大高于肠杆菌属和微杆菌属的细菌数量,为家蚕蛹油降解细菌中的优势菌群。多样性分析结果表明,芽孢杆菌属的多样性指数、丰富度指数、均匀度指数和优势度指数都高于其他两个属的细菌。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:符号说明

声明

1前言

1.1制丝废水污染及处理现状概述

1.2制丝废水处理方法

1.2.1物理法

1.2.2化学法

1.2.3物理化学法

1.2.4生物法

1.3油脂废水微生物降解的研究进展

1.3.1油脂废水的危害

1.3.2微生物降解途径的主要类型

1.3.3微生物降解油脂的机理

1.3.4降解油脂的微生物

1.3.5生物修复在油脂降解中的应用

1.4本研究的目的和意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1样品采集

2.1.2细菌分离及筛选培养基

2.1.3主要软件

2.1.4主要药品试剂

2.1.5主要仪器

2.2方法

2.2.1细菌的分离与计数

2.2.2家蚕蛹油含量测定的标准曲线制作

2.2.3细菌对家蚕蛹油的降解能力测定

2.2.4家蚕蛹油降解细菌rep-PCR基因指纹分析

2.2.5细菌菌体形态观察及生理生化指标测定

2.2.6家蚕蛹油降解细菌16SrDNA序列同源性分析

2.2.7家蚕蛹油降解细菌的多样性分析

3 结果与分析

3.1细菌的分离与计数

3.2细菌对家蚕蛹油的降解能力

3.2.1家蚕蛹油含量测定的标准曲线

3.2.2细菌对家蚕蛹油的降解能力

3.3家蚕蛹油降解细菌的指纹图谱分析

3.4家蚕蛹油降解细菌的鉴定结果

3.4.1家蚕蛹油降解细菌的形态特征和生理生化特性

3.4.2家蚕蛹油降解细菌的16S rDNA序列分析结果

3.4.3家蚕蛹油降解细菌的多样性分析

4讨论

4.1油脂降解菌的筛选方法

4.2细菌的分类与鉴定方法

4.3油脂微生物降解的影响因素

4.4降解细菌种群结构的研究

4.5下一步的工作设想

5 结论

5.1家蚕蛹油降解细菌的降解能力

5.2家蚕蛹油降解细菌的rep-PCR基因指纹分析

5.3家蚕蛹油降解细菌的鉴定

5.4家蚕蛹油降解细菌的多样性分析

参考文献

附录

致谢

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