苦参碱调控p16INK4a/cyclinD1/CDK4通路干预N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝基胺致大鼠膀胱癌的研究

摘要

目的：研究苦参碱对 N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝胺(BBN)诱导的大鼠膀胱癌膀胱组织p16INK4a/cyclinD1/CDK4细胞周期调控通路中各蛋白的表达，阐明苦参碱降低大鼠膀胱癌浸润率的分子机制。
　　方法：雄性Sprague-Dawley大鼠，随机分为6组，分别是正常组、模型组、塞来昔布阳性药物对照组、苦参碱50、100和200mg·kg-1·d-1剂量组。塞来昔布按500mg·kg-1·d-1灌胃给药；苦参碱剂量分别为50、100、200mg·kg-1·d-1灌胃给药；正常对照组和模型组给予等剂量生理盐水。在上述给药的基础上，从第二周开始除正常组给予等体积溶剂对照液外，其余各组灌胃给予膀胱癌致癌剂BBN（200mg·0.5mL-1·只-1），每周2次，共给药8周。各组动物于35周后处死，组织病理学检查膀胱组织形态以及免疫组织化学方法检测膀胱组织中p16INK4a的表达情况；Western blot方法测定各组大鼠膀胱组织p16INK4a/cyclinD1/CDK4细胞周期调控通路中p16INK4a、cyclinD1、CDK4的表达情况。
　　结果：免疫组织化学结果显示 p16INK4a蛋白表达定位于胞核，少量表达于胞浆。Western blot结果显示，与正常组相比，BBN诱导的大鼠膀胱癌模型组膀胱组织中p16INK4a的表达量显著性降低（P＜0.01），cyclinD1和CDK4的表达明显升高（P＜0.01）；与BBN诱导的大鼠膀胱癌模型组相比，苦参碱200mg·kg-1·d-1剂量组p16INK4a的表达量显著升高（P＜0.05），苦参碱50和200mg·kg-1·d-1剂量组cyclinD1的表达量下降（P＜0.05），CDK4蛋白在苦参碱200mg·kg-1·d-1剂量组也表现为显著性降低（P＜0.05）。
　　结论：苦参碱能通过对大鼠膀胱组织p16INK4a/cyclinD1/CDK4细胞周期调控通路的影响，进而抑制BBN诱导的大鼠膀胱癌的发展。

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前 言

材料与方法

1. 材料

2 试验方法

3. 统计学处理

结 果

1. 苦参碱对BBN诱导的大鼠膀胱癌膀胱组织的病理改变

2. 苦参碱对BBN诱导的大鼠膀胱癌组织中p16INK4a表达的影响

3. 苦参碱对BBN诱导的大鼠膀胱癌膀胱组织cyclinD1蛋白表达的影响

4. 苦参碱对BBN诱导的大鼠膀胱癌膀胱组织中CDK4蛋白表达的影响

讨 论

结 论

参考文献

综 述肿瘤与细胞周期蛋白调控

1 Cyclins的结构、生物学特性及功能

2.1 CyclinA与恶性肿瘤

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文