高繁山羊发情周期不同阶段子宫FSHRmRNA表达的定量分析及FSHR免疫阳性细胞分布研究

摘要

卵泡刺激素(FSH)刺激卵巢卵泡的发育、成熟以及颗粒细胞产生雌激素及影响睾丸支持细胞的功能进而间接影响精子的形成。黄体生成素(LH)则主要刺激卵巢膜细胞雄激素的产生，为颗粒细胞提供合成雌激素的底物，以及启动动物的排卵和维持黄体孕酮产生，在睾丸则刺激睾丸Ledig细胞产生雄激素，为精子发育提供适宜的雄激素环境。促性腺激素与这些性腺器官的靶细胞膜的特异性受体结合，引起受体构型变化，调节腺苷酸环化酶的活性，催化三磷酸腺苷(ATP)转化为环一磷酸腺苷(cAMP)，进而激活依赖cAMP的蛋白激酶，合成相应的mRNA，产生新的效应蛋白。目前关于FSHR在性腺外组织表达的研究很少。选择与动物生殖相关的子宫作为研究对象，用荧光定量RT-PCR的方法和免疫组织化学的方法研究其在子宫中的表达情况，并进一步探讨其在子宫中表达的意义。 本研究分为两部分： 一、采用荧光定量RT-PCR方法研究了在发情周期不同阶段济宁青山羊子宫中促卵泡素受体(FSHR)基因的表达情况，并通过实时荧光定量PCR方法比较研究了发情周期不同阶段FSHR基因的表达量差异。二、采用免疫组织化学的方法研究了FSHR免疫阳性细胞在子宫中的定位与分布。研究结果如下： 1、在各个时期的子宫中都有FSHR基因的表达，在子宫颈为间情期的表达水平最低(1.003±0.050)，发情前期有所升高(5.660±1.517)，发情期达到最高(8.419±2.430)，发情后期又有所下降(2.361±0.097)。发情期与发情后期和间情期之间的差异均显著(P<0.05)，发情周期的其它各个阶段相互之间差异不显著(P>0.05)。而在子宫角的情况则不同，发情前期(2.224±1.202)比间情期(1.043±0.295)和发情期(1.147±0.466)略高(P>0.05)，发情后期(13.320±3.702)显著高于其它各个时期(P<0.05)。 2、在子宫内膜固有层中也有散在的细胞染色阳性，子宫内膜的上皮细胞以及子宫腺的腺细胞呈阴性反应，而子宫颈上皮细胞呈阴性。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

文献综述

1 FSHR的研究历史

2 FSHR在子宫组织中的表达及FSHR缺失引起的子宫病变

3研究FSHR在子宫中表达的目的和意义

实验 促卵泡素受体mRNA在济宁青山羊发情周期不同阶段子宫表达规律及在子宫中的分布研究

1 材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1总RNA及PCR产物的电泳

2.2梯度PCR的电泳

2.3阴性对照和阳性对照

2.4实时定量检测结果

2.5免疫组织化学检测

3讨论

3.1其它激素受体与FSHRmRNA在子宫颈中的表达

3.2 FSHRmRNA水平在发情周期不同阶段子宫颈中的变化与相关生殖激素的联系

3.3 FSHR在子宫角中表达的潜在可能性

3.4 FSHRmRNA在发情周期不同阶段济宁青山羊子宫角中的表达量变化

4结论

参考文献

附录图版及图版说

致谢

攻读学位期间发表的论文