多靶点抑制剂联合细胞毒药物治疗恶性胶质瘤疗效的实验研究

摘要

目的：采用多靶点抑制剂凡德他尼(EGFR、VEGFR和RET酪氨酸激酶抑制剂)联合卡莫司汀(BCNU)对大鼠体外及体内C6胶质瘤细胞的作用,研究多靶点抑制剂联合细胞毒药物对C6鼠胶质瘤增殖及侵袭的影响。
　　方法：传代培养C6大鼠胶质瘤细胞,MTT比色法检测药物对细胞活性的影响,HE染色观察细胞形态的变化。原位注射法建立C6大鼠胶质瘤模型,6天后分为凡德他尼组,BCNU组,联合药物组(凡德他尼+BCNU)及空白组,隔天给药7次,两周后断头法处死大鼠取脑,做肿瘤组织切片,计算肿瘤体积;Envision免疫组化法标记肿瘤血管内皮细胞,检测移植瘤中微血管密度(MVD);检测与肿瘤侵袭性有关的MMP1蛋白的表达;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。
　　结果：联合药物组促进肿瘤细胞调亡效果显著高于BCNU组(P<0.01)。与空白组比较,BCNU组移植瘤体积下降了34.0％(P<0.05),移植瘤中MMPl表达为(++),MVD无明显变化,移植瘤细胞凋亡率62.6%(P<0.05);联合药物组移植瘤体积下降了56.0%(P<0.05),移植瘤中MMPl表达阳性(+),MVD减少了53%(P<0.05),细胞凋亡率82.0%(P<0.05)。
　　结论：联合用药不仅能明显抑制C6大鼠胶质瘤细胞移植瘤生长还能降低与肿瘤侵袭能力有关的MMP1蛋白表达,这为临床上多靶点抑制剂与细胞毒药物联合治疗恶性胶质瘤提供实验依据。

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前言

材料与方法

1.1材料

1.2实验方法：

1.2.1实验的基本方法路线：

1.2.2 C6大鼠胶质瘤细胞培养：

1.2.3 MTT检测药物对C6细胞活性的影响

1.2.4 HE染色观察细胞形态变化

1.2.5 实验动物的选择

1.2.6 建立C6大鼠胶质瘤模型

1.2.7 实验分组

1.2.8 肿瘤体积的测量

1.2.9 移植瘤中微血管密度(MVD)检测

1.2.10 检测肿瘤中MMP1蛋白的表达

1.2.11 检测肿瘤细胞凋亡指数

1.2.12 统计学分析

结果

2.1药物对C6细胞的体外增殖抑制作用

2.2药物作用后的细胞形态改变

2.3 Wistar大鼠颅内移植瘤模型大体观察

2.4原位移植瘤体积变化

2.5移植瘤中微血管密度(MVD)

2.6肿瘤中MMP1蛋白的表达

2.7移植瘤细胞凋亡指数（AI）变化

2.8结果概述：

讨论

结论

参考文献

综述

致谢

攻读学位期间发表的学术论文