取食平菇菌糠的白星花金龟生物学研究

摘要

白星花金龟（Protaetia（Liocola）brevitarsis(Lewis)）是一种常见昆虫，幼虫为腐食性，在自然界中主要取食畜禽粪便、腐烂的作物秸秆以及杂草等，针对此特点，本论文在对其主要生物学特性、肠道细菌及肠道酶活力水平等进行研究的基础上，对其幼虫取食平菇菌糠的效果进行了研究，为白星花金龟幼虫转化处理平菇菌糠提供理论依据。主要研究结果如下:
　　1、白星花金龟成虫取食食物不同，产卵量也不相同，取食桃子的白星花金龟雌成虫产卵量最大，单头产卵总量可达78.24粒;而用梨饲喂的白星花金龟产卵量最少。菌糠含水量为50％时，白星花金龟单雌产卵量最高，为88.3粒，产卵期可持续60～85 d左右。在30℃条件下，白星花金龟幼虫孵化的平菇菌糠适宜含水量为45％～55％，含水量为45％时，幼虫的孵化率最高，为86.5％，卵期为8.12d。
　　2、通过实验确定了白星花金龟幼虫最佳取食温度为28℃，最佳平菇菌糠含水量为60％，在虫料比为9.15％（幼虫重/菌糠重）条件下时，幼虫取食平菇菌糠效果最好。在温度和湿度最适宜的条件下，以平菇菌糠饲喂幼虫，每100 g的白星花金龟幼虫3d取食量为119.89 g，增重10.38 g，产生虫粪96.32 g。各龄期幼虫在消化率、转化率方面无显著差异，3龄幼虫利用率最高，为8.74％。
　　3、不同龄期的白星花金龟幼虫Cx酶（外切β-1，4-葡聚糖酶）、β-1，4-葡萄糖苷酶和蛋白酶活性差别不显著;3龄幼虫的C1酶（内切β-1，4-葡聚糖酶）活性明显高于1龄和2龄幼虫，为97.35 U·g-1，1龄和2龄白星花金龟幼虫的C1酶活性之间差异并不显著;半纤维素酶方面，3龄的半纤维素酶活性最高，为34.36 U·g-1，显著高于其他两个龄期的幼虫。
　　利用常规分离培养方法从取食平菇菌糠的白星花金龟3龄幼虫肠道中分离纯化获得9株细菌菌株，对其生理生化性状进行了系统研究，并结合16SrDNA技术对肠道分离菌株进行了鉴定，结果表明可培养的细菌菌株均为芽孢杆菌属（Bacillus）。
　　4、试验测得平菇菌糠营养成分中含量最多的是粗纤维，为21.70％;其次是粗灰分，占干物质的16.80％;粗蛋白占干物质的14.30％;含量最少的是粗脂肪，占干物质的0.39％。平菇菌糠中含有17种氨基酸，包括8种必须氨基酸、7种非必须氨基酸及2种半必需氨基酸。各种氨基酸含量相差不大，谷氨酸含量最高，为1.00 g·100g-1，蛋氨酸含量最少，为0.05 g·100g-1。必需氨基酸与非必需氨基酸的百分比为66.85％，必需氨基酸与总氨基酸的百分比为37.16％。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 食用菌菌糠资源化利用研究进展

1．1．1 菌糠的主要成分

1．1．2 食用菌菌糠的资源化利用现状

1．2 白星花金龟研究进展

1．2．1 白星花金龟生物学研究

1．2．2 白星花金龟应用研究

1．3 昆虫体内消化酶的研究

1．3．1 昆虫纤维素酶的研究

1．3．2 昆虫蛋白酶的研究

1．4 昆虫肠道微生物的研究

1．5 研究目的和意义

2 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 生物材料

2．1．2 供试化学试剂

2．1．3 培养基及其制作

2．1．4 主要试验仪器

2．2 研究方法

2．2．1 平菇菌糠营养成分的测定

2．2．2 白星花金龟成虫产卵特性

2．2．3 白星花金龟幼虫取食平菇菌糠的研究

2．2．4 白星花金龟幼虫消化酶活性的测定

2．2．5 白星花金龟幼虫肠道细菌研究

2．3 数据处理

3 结果与分析

3．1 平菇菌糠营养成分分析

3．1．1 平菇菌糠常规营养成分分析

3．1．2 平菇菌糠氨基酸含量

3．2 白星花金龟成虫产卵的研究

3．2．1 不同营养对白星花金龟成虫产卵量的影响

3．2．2 平菇菌糠含水量对成虫产卵量的影响

3．2．3 平菇菌糠含水量对白星花金龟幼虫孵化的影响

3．3 白星花金龟幼虫取食平菇菌糠的研究

3．3．1 温度对幼虫取食平菇菌糠的影响

3．3．2 平菇菌糠含水量对白星花金龟幼虫取食效果的影响

3．3．3 不同龄期幼虫取食平菇菌糠的比较

3．3．4 白星花金龟幼虫密度的确定

3．4 白星花金龟幼虫消化酶活性的测定

3．4．1 标准曲线的制作

3．4．2 不同龄期幼虫纤维素酶、半纤维素酶与蛋白酶活性

3．5 白星花金龟幼虫肠道细菌的分离与鉴定

3．5．1 生理生化常规鉴定研究

3．5．2 PCR扩增产物电泳检测

3．5．3 白星花金龟幼虫肠道细菌分子鉴定结果

4 讨论

4．1 白星花金龟主要生物学特性

4．2 白星花金龟幼虫取食平菇菌糠的研究

4．3 白星花金龟消化酶活性的研究

4．4 白星花金龟幼虫肠道细菌

5 结论

5．1 平菇菌糠营养成分分析

5．2 白星花金龟成虫产卵特性

5．3 白星花金龟幼虫取食平菇茵糠

5．4 白星花金龟幼虫消化酶酶活性和幼虫肠道细菌

附件 (白星花金龟幼虫肠道细菌DNA序列)

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文