杏仁核电点燃致痫大鼠神经肽Ghrelin水平表达变化的研究

摘要

目的：观察神经肽Ghrelin在杏仁核电点燃大鼠外周血与脑组织中的变化，探讨其原因及意义。
　　方法：健康雄性SD大鼠64只，随机分为点燃组（n=48）、假手术组（n=8）、空白组（n=8），点燃组以最后一次刺激为零点，再分为3h、6h、12h、24h、48h、72h六个亚组，每个亚组8只。点燃组植入电极后给予电刺激，制作杏仁核点燃膜型；假手术组只植入电极不予刺激；空白组不予处理。观察大鼠行为学及脑电图变化，采用ELISA、免疫组化和实时荧光定量PCR分别检测血清中和下丘脑中辛酰化Ghrelin表达情况。采用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（xs）表示，采用单因素方差分析，组间比较用最小显著法（LSD-t）。
　　结果：（1）杏仁核电点燃致痫大鼠癫痫发作情况：点燃大鼠在刺激最初表现为胡须抖动、点头，随着刺激增多，出现抽搐、前肢阵挛等症状，完全点燃时表现为后肢站立并跌倒，全身抽动，湿狗样抖动，发作时间约15s到数分钟。点燃组后放阈为（441.54±52.43）μA，点燃速度为（7.12±2.13）d。实验组大鼠均可达到Ⅴ级发作。
　　（2）杏仁核电点燃致癫痫大鼠血清中辛酰基化 Ghrelin的浓度变化：空白组与假手术组之间差异无统计学意义（P>0.05），各时间点辛酰基化 Ghrelin水平与假手术组比较均降低（P<0.05）。各时间点组间比较，3h组与6h组、6h组与12h组、24h组与48h组、48h组与72h组比较，差异有统计学意义（P<0.05），12h组与24h组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
　　（3）杏仁核电点燃致痫大鼠下丘脑中辛酰基化Ghrelin蛋白的表达：空白组与假手术组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与假手术组比较，癫痫组各个时间点的辛酰基化Ghrelin表达水平均降低，各相邻组间比较3h组与6h组、6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组、48h组与72h组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　（4）癫痫发作后大鼠下丘脑Ghrelin mRNA的表达：空白组与假手术组比较，Ghrelin mRNA相对表达量差异无统计学意义（P>0.05）。各时间点组与假手术组比较，Ghrelin mRNA表达水平均降低，差异有统计学意义（P<0.05）；各时间点组间比较，3h组与6h组、6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组间比较，差异有统计学意义平（P<0.05）；48h组与72h组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：癫痫发作后，血清与下丘脑中神经肽Ghrelin水平均降低且变化趋势是一致的，通过检测血清中辛酰基化Ghrelin水平，可以反映下丘脑中相应神经肽的变化趋势，可能成为临床癫痫诊断和疗效评估的一种新型检测指标。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

中英文缩略词表

目录

前言

材料与方法

1 实验材料

1.1 实验动物与分组

1.2 实验所需主要仪器设备

1.3 实验所需试剂

2 实验方法

2.1 动物模型的构建：

2.2 标本的采集提取及保存

2.3 实验原理及步骤

3 统计学处理

结果

1 杏仁核电点燃致痫大鼠癫痫发作表现

2 杏仁核电点燃致癫痫大鼠血清中辛酰基化Ghre lin的浓度变化

3 杏仁核电点燃致痫大鼠下丘脑中辛酰基化Ghre lin蛋白的表达。

4癫痫发作后大鼠下丘脑Ghrelin mRNA的表达（表5）

讨论

结论

参考文献

综述

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文