山羊精液液态保存过程中氧化还原态的变化及人工授精

摘要

精液的长期保存通常采用冷冻保存，该技术在牛上已实现了商业化，但是山羊的精液冷冻效果却不理想，受精率和妊娠率较低，因此主要以液态保存为主。研究中发现，山羊精液液态保存至12天与保存16天时活率均能达到40％左右，但利用保存12天和16天的精液人工授精母羊的受胎率却出现显著差异，有必要进一步研究和分析母羊的受胎率差异的原因，为进一步提高山羊精液液态保存方案奠定基础。本实验利用mZAP的改进液MES稀释液，添加20％的卵黄包被，然后再用MES稀释液保存精子，研究不同保存时间精子活力和存活率、精子质膜和顶体完整性、精液稀释液中氧化还原状态的变化以及对保存12天和15天的精液进行人工授精，结果如下:(1)精子的活力和存活率随着保存时间的延长而逐渐下降，其中活力在第14天下降幅度最大，存活率在第15天显著降低;(2)精子质膜完整性在第14天显著下降，顶体完整性从第15开始有显著下降;(3)精液稀释液中的氧化还原状态随保存时间的延长也发生变化，TOS含量逐渐升高，第14天变化幅度最大;还原态也是随着保存时间的延长而升高，但从第14天开始，还原态开始下降。第14-16天精子的OSI的上升幅度达到最大;(4)保存12天的精液人工授精后受胎率与对照组无显著差异，但保存15天组受胎率显著降低。上述结果表明，山羊精液液态保存过程中，精子活力、存活率、质膜完整、顶体完整都会随保存时间的延长而逐渐下降，保存12天的精液具有与对照组几乎相当的受胎率，但保存15天精液受胎率明显下降。

目录

声明

摘要

前言

1．1 精液稀释液的组成成分和作用

1．2 影响山羊精液液态保存的因素

1．2．1 液态保存方案及其建立的理论依据

1．2．2 山羊精液液态保存过程的影响因素-温度

1．2．3山羊精液液态保存的影响因素-卵黄包被

1．2．4 山羊的精液液态保存的影响因素-渗透压和pH

1．3 氧化应激对山羊精液液态保存的影响

1．3．1 氧化应激的概念及种类

1．3．2 氧化应激的产生机理

1．3．3 氧化应激的影响及抗氧化系统

1．4 精液质量检查

1．4．1 活力及存活率检测

1．4．2 质膜完整性的检测

1．4．3 顶体完整性的检测

1．5 本实验的研究目的及意义

2 材料方法

2．1 实验用品

2．2 实验动物

2．3 精液的采集和稀释和保存

2．4 精液的质量检测

2．4．1 精子活力和存活率的检测

2．4．2 精子质膜完整率的检测

2．4．3 顶体完整率检测

2．5 氧化还原态的检测

2．5．1 总氧化物质的检测

2．5．2 总还原物质的检测

2．5．3 氧化还原比

2．6 人工授精

2．6．1 发情鉴定

2．6．2 人工授精操作

2．6．3 妊娠诊断

2．7 实验设计与操作

2．7．1 精液稀释液的配制

2．7．2 精液质量检查

2．7．3 人工授精实验

2．8 统计与分析

3 结果与分析

3．1 不同保存时间精液活力和存活率的变化

3．2 不同保存时间对液态保存过程中精子质膜和顶体完整的影响

3．3 不同保存时间精液氧化还原态的变化

3．4 保存第12天和第16天精液的参数比较

3．5 人工授精实验

4 讨论

4．1 影响精液液态保存过程中精子活力和存活率的因素

4．2 影响液态保存过程中精子质膜完整和顶体完整的因素

4．3 液态保存过程中氧化还原态的变化

4．4 人工授精的影响因素

4．4．1 pH

4．4．2 冷应激

4．4．3 氧化应激

4．4．4 人工授精过程中人为因素的影响

5 结论

参考文献

致谢

附录：图版及图版说明