猴头菇胞内胞外多糖的结构、抗氧化活性和保肝护肝能力分析

摘要

猴头菇（Hericium erinaceus），又名猴头菌、刺猥菌、猴菇、猴蘑。猴头菇富含多种营养物质，如多糖、维生素、蛋白质、各种微量元素等。猴头菇多糖有提高肌体免疫力，抗氧化，抗衰老等作用。
　　本课题提取了猴头菇胞外多糖（extracellular polysaccharides，EPS）和胞内多糖（intracellular polysaccharides，IPS），通过DEAE纤维素柱分离EPS和IPS组分；红外吸收光谱测定了 EPS和IPS组分的分子键和官能团；高效液相色谱测定了 EPS和IPS的单糖组成和摩尔比；并且对 EPS和IPS的体外抗氧化能力和保肝护肝作用进行了测定。结果如下：
　　1、通过DEAE纤维柱分离出EPS和IPS各有两种组分，分别命名为EPS-1、EPS-2、IPS-1和IPS-2。通过气相色谱测定出EPS由阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成，摩尔比为1:7:14:52；IPS由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成，摩尔比为3:4:7:14:137。通过红外光谱测定了EPS-1、EPS-2、IPS-1和IPS-2的化学键和特征官能团。EPS-1分子键包括N-H、O-H键、C=C键、C=N键和N=N键、饱和C-H键和不饱和C-H键，官能团中含有醇酚缔合物、单体酸和酸的缔合物、胺基和亚胺基、烯烃、偶氮、CH3、CH2基团以及只有1个氢原子的芳烃基团。EPS-2分子键包括N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键，官能团有单体酸、胺基和亚胺基、烯烃和偶氮基团。IPS-1含有N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键、饱和C-H和不饱和C-H，官能团有醇酚单体和其缔合物、单体酸、胺基和亚胺基、烯烃、亚胺和肟、偶氮、CH3、CH2基团、1个氢原子的芳烃、炔。IPS-2含有N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键。官能团有胺基、烯烃和偶氮。
　　2、体外抗氧化活性：以还原力、羟基自由基（·OH）清除率，1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）清除率为指标，对EPS和IPS的抗氧化作用进行了测定。结果表明，EPS和IPS都有较强的体外抗氧化能力，且EPS的体外抗氧化能力高于IPS。
　　3、体内保肝护肝活性：建立了CCl4诱导的小鼠肝损伤模型，测定小鼠血液中谷草转氨酶（AST），谷丙转氨酶（GPT）和胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、血清白蛋白（ALB）含量的变化，肝组织中的过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化，过氧化脂质（LPO）、丙二醛（MDA）的含量变化。结果表明EPS和IPS降低了实验组小鼠血液中AST和GPT水平，使CHOL、TG和ALB回复正常水平；提高了肝组织中CAT和SOD活性，降低了LPO和MDA的含量，具有十分有效的保肝护肝作用。此外通过观察肝组织切片，发现 EPS和IPS肝组织切片呈与正常组小鼠肝切片一致的健康状态，直接证明了EPS和IPS对肝脏具有保护作用。
　　综上所述，猴头菇 EPS和IPS具备较强的体外抗氧化活性和保肝护肝作用，可以以此为基础研发保肝护肝药物；猴头菇 EPS和IPS的单糖组成分析对研究多糖的构效关系具有重要意义。

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1引言

1.1猴头菇

1.2多糖及食用菌多糖

1.3 本课题的目的和意义

2材料和方法

2.1实验菌种

2.2培养基和培养条件

2.3主要设备和试剂

2.4实验方法

3结果与分析

3.1猴头菇EPS和IPS的纯化

3.2猴头菇EPS和IPS气相色谱分析

3.3猴头菇组分的红外光谱分析

3.3猴头菇EPS和IPS的体外抗氧化活性

3.4猴头菇EPS和IPS的保肝护肝作用

4讨论

4.1.猴头菇EPS和IPS结构分析

4.2体外抗氧化能力分析

4.3保肝护肝能力分析

5结论

5.1.猴头菇EPS和IPS的结构

5.2体外抗氧化能力

5.3保肝护肝能力分析

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文及成果