山东省部分地区鸡源致病菌耐药性及中药防治研究

摘要

近年来细菌性疾病在家禽养殖场普遍存在，发生率较高；而且随着抗菌药物在临床上的广泛应用，耐药性问题日趋严重，出现了多重耐药菌株和超级耐药菌，给人们和动物的健康带来极大的危害，细菌耐药性问题己经成为公共卫生和农产品安全的一个焦点问题。面对细菌日益严峻的耐药形势及抗生素使用越来越严格这一现状，寻找有效的中药进行细菌防治是较为可行的办法之一。为了较全面了解家禽养殖场主要致病菌种类及其耐药性情况并找到有效的抗菌中药，本课题从山东省烟台市和青岛市等地利用常规方法对致病菌进行了分离鉴定、药物敏感性测定及中药筛选防治等相关研究。试验结果如下：
　　经过从疑似病例采样共分离得到了21株致病菌株，经过16s rRNA鉴定发现，其中大肠杆菌4株、沙门氏菌9株、变形杆菌1株、志贺氏菌7株，这些致病菌均可引起人畜共患细菌病。根据CLSI（2014）提供的试验标准，利用K-B法对21株菌株分别测定对38种药物的敏感性，发现存在不同程度的耐药性，从试验结果来看，这4类致病菌对四环素类药物耐药性最严重，甚至对强力霉素的敏感性也不高；其次对氨基糖苷类药物耐药性较强，特别是对卡那霉素耐药性较为突出，对阿米卡星部分敏感；对喹诺酮类药物具有一定耐药性，但大部分致病菌对左氧氟沙星敏感；对β-内酰胺类药物耐药性较低，对大多数头孢类药物敏感，但少数致病菌对氨曲南也产生了耐药性。这4类致病菌中志贺氏菌对抗菌药的耐药率较高，而且还发现了对多粘菌素B耐药的奇异变形杆菌和沙门氏菌各一株。针对耐药菌株对喹诺酮类药物耐药基因 gyrA和氨基糖苷类药物耐药基因aph（3'）-IIa进行检测，二者检出率均为100％。另外，本课题依据中医古籍并选择目前研究较少的中药种类开展了抗菌研究。对33种中草药如广木香、老鹳草、功劳木等煎煮后得到一定比例的药材原液，利用牛津杯法，对CVCC3377肠炎沙门氏菌标准菌株进行抗菌中药筛选。发现老鹳草的抑菌圈直径为100~160 mm，广木香的抑菌圈直径为160~180 mm，翻白草的抑菌圈直径为100~110 mm，功劳木的抑菌圈直径为950~120 mm，选取老鹳草对14日龄海兰蛋鸡进行体内药效试验发现，鸡采用灌胃途径接种沙门氏菌，在0 h、6 h、24 h分别灌服老鹳草药液，48 h对各组的鸡进行采血及器官采集，制作血涂片和组织器官切片，观察病变改善情况，发现老鹳草能够明显减轻肝脏损伤，对肾脏病变的作用不明显。
　　以上结果表明，在山东部分家禽养殖场存在大肠杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、志贺氏菌等多种细菌性疾病，而且细菌耐药性较严重，存在多重耐药性；中药对细菌性疾病防治具有一定作用。

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1引言

1.1 鸡源常见致病菌介绍

1.2 16S rRNA鉴定细菌种类原理介绍

1.3 致病菌耐药情况

1.4 中药抗菌研究进展

1.5 本课题研究目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 分离菌株情况

3.2 16S rRNA鉴定结果

3.3 耐药结果

3.4 33种中药体外抑菌结果

3.5 鸡血涂片及病理切片分析

4 讨论

4.1 关于家禽养殖业细菌性疾病问题

4.2 关于家禽养殖业细菌耐药性问题

4.3 关于中药对细菌性疾病的防治

5 结论

参考文献

附录

致谢