ALV-A对鸡、鹌鹑的致病性比较及其亚单位疫苗的免疫保护效果

摘要

A亚群禽白血病病毒（ALV-A）是一种主要感染家禽的反转录病毒，可引起免疫抑制、淋巴肿瘤、血管瘤甚至死亡等。ALV-A自然宿主是鸡，血清学调查表明ALV-A在我国鸡群中感染率高达47.9％；近年来，一些报道显示在我国非自然死亡的野生鸟类中也分离到ALV-A，这说明鸟类可能作为ALV-A潜在的感染宿主。至今，有关ALV-A对鸟类的致病性尚未见报道。本研究使用肉种鸡分离的ALV-A毒株对成年鸡、鹌鹑和鸽子进行致病性观察，利用制备的gp85蛋白疫苗对鸡和鹌鹑进行免疫接种试验，评价了免疫保护效果，为理解外源性ALV在不同鸟类流行中的科学意义和建立禽白血病科学防控措施提供依据。
　　本研究首先对送检的山东潍坊黑土鸡肿瘤组织样品进行PCR扩增、测序，单抗介导的IFA检测，并通过体外病毒增殖分离获得病毒毒株，对病毒进行全基因测序，利用生物信息软件分析其进化关系。使用早期分离的ALV-A-SDAU09C1毒株，设计不同感染剂量对幼龄鹌鹑和高剂量对成年鸡、鹌鹑和鸽子进行致病性观察。利用制备的ALV-A亚单位疫苗对种鸡和鹌鹑分别进行免疫接种，收集种蛋，对孵化的鹌鹑和雏鸡进行攻毒试验，评价了免疫保护效果。
　　结果表明：（1）从肿瘤样品中分离出一株ALV-A毒株，经全基因测序显示该毒株与已分离的A亚群ALV毒株PDRC-1039、PDRC-3246、PDRC-3249同源性较高，分别为95.8%、95.9%和96.0%。（2）三个剂量的ALV-A人工感染7日龄鹌鹑后，在24d内所有鹌鹑（0/15）均没有检测到病毒血症和泄殖腔排毒以及组织肿瘤；高剂量（106 TCID50/只）的ALV-A感染成年鸡后21d内有80%（4/5）的鸡检测出病毒血症和泄殖腔病毒，且在内脏组织中检测到ALV-A病毒；感染成年鹌鹑后仅有17%（1/6）在第6天检测到“一过性”病毒血症，而泄殖腔没有检测到排毒现象；感染的成年鸽子（0/5）均没有检测病毒血症和泄殖腔排毒，在鹌鹑和鸽子内脏组织中也均未检测到ALV-A病毒。（3）ALV-A亚单位疫苗抗原联合CpG佐剂对种鸡和鹌鹑均能产生高效价的血清抗体，抗体阳性率均达到100%(9/9和13/13)；对孵化后的雏鸡实施攻毒，病毒血症为22%（2/9）、泄殖腔排毒率为22%（2/9）、死亡率为0%；对孵化后的鹌鹑实施攻毒，病毒血症为15%(2/13)、泄殖腔排毒率0%（0/13）、死亡率为15%（2/13）。
　　结论：从我国地方黑土鸡分离出一株ALV-A毒株；鸡、鹌鹑和鸽子对外源性ALV-A易感性差别较大，其中鸡较易感和易产生排毒，而鹌鹑和鸽子不易感，不易产生泄殖腔排毒；ALV-A亚单位疫苗联合CpG佐剂，可通过种鸡和种鹌鹑免疫接种的方法，对后代产生较好的免疫保护效果。