Bt蛋白Cry1Ab、Cry1F及Cry3B对蚯蚓及其肠道微生物的影响

摘要

转基因植物进行商业化种植的20多年以来，创造了巨大的农艺、环境、经济、健康和社会效益。在转基因作物大面积推广的今天，其生态安全性也成了社会各界日益关注的问题，尤其是转基因植物对非靶标生物的影响。本研究使用Bt蛋白经喂食对蚯蚓进行染毒处理，分析比较经染毒的蚯蚓在生理指标、酶活性、肠道微生物以及体腔细胞的DNA损伤程度的变化，从而评价Bt蛋白的安全性。本实验的主要研究结果如下： （1）使用选定的Bt蛋白喂食蚯蚓，蚯蚓在第7d体重有明显增长，且成活率都在99%以内。第7d及第14d，喂食Bt蛋白的蚯蚓的体重增长率，产卵量以及成活率较对照组无明显差异，说明Bt蛋白对蚯蚓的生长发育没有显著抑制作用。 （2）对喂食Bt蛋白蚯蚓体内的两种防御酶SOD、CAT，三种解毒酶POD、GST和AchE，分解有机物的纤维素酶酶活性测定分析表明：喂食Bt蛋白的蚯蚓体内酶活性与对照组的蚯蚓体内的酶活性指标并无显著差异，Bt蛋白对蚯蚓的酶活性无显著影响。 （3）应用彗星实验对蚯蚓体腔细胞DNA的损伤进行了检测，结果表明：各处理组的体腔细胞的Olive尾距、尾长及尾部DNA含量值与对照组之间无显著差异，且在Bt蛋白浓度增加时，蚯蚓的体腔细胞的DNA 损伤并未呈现出较好的剂量-效应关系，因此Bt蛋白并未加强对蚯蚓的体腔细胞DNA的损伤程度。 （4）采用Biolog方法通过多样性指数Shannon、优势度指数Simpson 以及均匀度指数McIntosh对喂食Bt蛋白的蚯蚓肠道菌群的多样性进行了分析，结果表明：与对照组相比各组蚯蚓的肠道菌群在菌群的物种多样性、优势菌群以及群落均一度等方面均无显著差异，因此Bt蛋白对蚯蚓肠道菌群微生物无显著影响。

目录

声明

符 号 说 明

1 前言

1.1转基因植物及其发展状况

1.2转Bt植物及其对环境的影响

1.3转Bt作物对土壤生态系统影响的研究进展

1.4蚯蚓的毒性试验在转基因植物生态安全评价中的应用

1.5选题依据与研究意义

2 材料与方法

2.1材料与试剂

2.2实验方法

3 结果与分析

3.1三种不同浓度的Bt蛋白对蚯蚓体重、产卵数以及存活率的影响

3.2 Bt蛋白对蚯蚓生化反应指标的测定

3.3 Bt蛋白对蚯蚓DNA损伤的鉴定

3.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响

4 讨论

4.1 蚯蚓的生理指标的研究

4.2 Bt蛋白对蚯蚓体内部分生化指标的影响

4.3 Bt蛋白对蚯蚓体腔细胞DNA的影响

4.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响

5 结论

参考文献

致谢