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【6h】

玉米二羧酸转运蛋白(DCT2)的突变体鉴定及转录组分析

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符号说明

摘要

1前言

1.1玉米的起源与发展

1.2玉米光合的研究进展

1.2.1植物的光合类型

1.2.2C3和C4光合作用的区别

1.2.3玉米是NADP-ME亚型植物

1.2.4C4光合关键酶作用的研究进展

1.2.5玉米C4光合作用的机理

1.2.6二羧酸转运蛋白的研究进展

1.3玉米叶色突变体的研究

1.4玉米基因功能的研究方法

1.4.1正向遗传学研究方法

1.5酵母单杂交技术的应用

1.6本课题研究的目的及其意义

2实验材料与方法

2.1材料

2.1.1植物材料及生长条件

2.1.4PCR引物

2.1.5培养基

2.2实验方法

2.2.1CTAB法玉米叶片基因组DNA的提取

2.2.2PCR鉴定菌株中是否有片段的插入

2.2.3玉米叶片Total RNA的提取

2.2.4转化大肠杆菌感受态DH5α及质粒提取

2.2.5RNA-Seq测序

2.2.6酵母单杂交

3结果与分析

3.1 dct2突变体的表型及目的基因定位

3.1.1 dct2突变体的表型

3.1.2通过图位克隆的方法对dct2突变体突变位点进行定位

3.1.3dct2突变体的光合生理指标测定

3.2.2 RNA-Seq数据统计

3.2.3差异基因功能富集及统计

3.3调控DCT2基因转录因子的筛选

3.3.1酵母诱饵表达载体的构建及自激活验证

3.3.2酵母菌株的梯度稀释

3.3.3酵母单杂交结果统计

3.3.4转录因子分析

4讨论

4.1 DCT2对玉米的光合过程至关重要

4.2突变体叶片的转录组测序变化以及生理指标变化情况

4.3 DCT2基因的酵母单杂交情况

5结论

参考文献

致谢

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