基于CDDP分子标记的山茶(Camellia japonica)天然居群遗传多样性的研究

摘要

山东是我国山茶（Camellia japonica）自然分布区的北界，该地区的山茶具有较强的耐寒性，蕴藏着极高的观赏价值和经济价值，是茶花育种的珍贵种质资源。由于受人为干扰破坏严重，目前其天然居群仅留存于青岛的大管岛和长门岩岛。近几年对现有个体的保护颇见成效，而居群中始终缺乏幼龄个体，存续状况不容乐观。为更好的了解保护这一珍贵植物资源，对其集中分布区长门岩岛的山茶群落结构进行了研究，同时使用CDDP分子标记技术对分布于两个岛屿的6个山茶居群的遗传多样性进行了分析，主要结果如下： 1.山茶群落结构较为简单，受人为干扰严重，低频度成分偏多。群落可分为乔木层、灌木层和草本层三个层次，乔木层多以刺槐等人工引种植物为主，郁闭度不高。山茶在灌木层中占重要地位，许多地方缺乏乔木层植物，其作为建群种存在，显示出亚热带常绿阔叶林的部分特征。草本层植物种类丰富，层间植物比较简单。 2.构建了20 μL，包含2×Es Taq MasterMix（含染料）10 μL、10 pmol?μL-1引物1 μL、40 ng?μL-1 DNA模板2 μL及ddH2O 7 μL的CDDP-PCR反应体系。 3.各居群的多态性位点百分率（PPL）在56.76%~83.78%之间，平均为71.85%；有效等位基因数（Ne）在1.3693~1.4698之间，平均为1.4157；Nei’s遗传多样性指数（Hs)在0.2135~0.2859之间，平均为0.2436；Shannon信息指数在0.3165~0.4331之间，平均为0.3690，高于Nybom统计的显性标记研究得到的多年生、广布、异交植物居群的平均值，表现出丰富的遗传多样性。 4. 6个山茶居群的遗传距离（GD）在0.0277~0.1208之间，平均为0.0719；遗传相似系数（Gs)在0.8862~0.9727之间,平均为0.9309。居群内Nei's遗传多样性指数（Hs)为 0.2435；居群间遗传分化系数（Gst)为 0.1525。基因流（Nm)的值为2.7785。几个居群遗传相似度较高，它们应具有相同的起源且分离时间不长，由于其虫媒传粉的特性保持着较频繁的基因交流（Nm＞1），各居群间存在一定的遗传分化。 5.山东地区山茶居群的遗传多样性水平较高，对现有资源应以就地保护为主，根据山茶的生理特性，适当增加群落乔木层的郁闭度，为山茶创造适宜生境，避免人为破坏，使其自然更新，并适时补种幼龄个体。由于岛屿生境的脆弱性，迁地保护也是一项重要举措，两个岛屿的居群规模小，涵盖遗传多样性丰富，应当对种质资源进行全面收集保护，并开展人工繁殖个体野外回归的研究及实践。

目录

声明

缩 略 词

1引言

1.1山茶概述

1.2遗传多样性研究概述

1.3 CDDP分子标记技术

1.4研究目的与意义

2材料与方法

2.1实验材料

2.2实验仪器

2.3主要试剂及配方

2.4研究方法

3结果与分析

3.1基因组DNA提取

3.2 CDDP-PCR反应

3.3聚类分析

3.4山茶群落组成和结构

4讨论

4.1山茶基因组DNA的提取

4.2 CDDP-PCR体系的优化

4.3山东地区山茶的遗传多样性

4.4山东地区山茶起源探讨

4.5山茶种质资源的保护与开发利用

5结论

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文