银屑病不同发展时期表皮角质细胞miR-21、miR-203a、miR-146a、miR-125b的表达

摘要

目的:探讨miR-21、miR-203a、miR-146a、miR-125b在寻常银屑病不同发展时期表皮角质细胞的表达情况。
　　方法:收集临床银屑病进行期、静止期、稳定期皮损组织、皮损旁组织、以及正常组织，经过速冻后提取微小RNA。采用Stem-loop技术反转录miRNA，Real time PCR检测 miRNA的表达，同时构建 pEASY-T5-miR-203a、pEASY-T5-miR-164a、pEASY-T5-miR-125b、pEASY-T5-miR-21、pEASY-T5-U6重组质粒，制备标准曲线，采用绝对定量方法计算 miR-21、miR-203a、miR-146a、miR-125b的拷贝浓度，采用t检验比较两组间的差异，显著统计学差异表示为p<0.05，极显著统计学差异表示为P<0.01。
　　结果:1、相比于正常皮肤组织，miR-21、miR-203a、miR-146a在银屑病的进行期、静止期、稳定期均呈现高水平表达（p<0.05），miR-125b则均呈现低水平表达（p<0.05）；2、相比于皮损组织，miR-21、miR-203a、miR-146a在银屑病的进行期、静止期、稳定期均呈现高水平表达（p<0.05），miR-125b则均呈现低水平表达（p<0.05）；3、皮损组织与正常组织相比，miR-21、miR-203a、miR-146a、miR-125b的表达差异不显著。
　　结论: miR-203a、miR-21、MiR-146a、miR-125b在银屑病不同发展时期成差异性表达，可能通过其靶基因调控STAT3、NF-κB、MAPKs、TNF-α等信号通路从而参与银屑病的发生与发展。

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前言

材料与方法

1.1主要试剂

1.2主要仪器

1.3实验方法

实验结果

2.1 miRNA PCR结果

2.2 重组质粒的鉴定

2.3 Real time PCR检测miRNA结果

2.5 皮损组织内miRNA表达检测水平

2.6 皮损旁组织内miRNA表达检测水平

2.6 皮损旁组织与正常组织miRNA表达检测

讨论

结论

参考文献

文献综述:microRNA与银屑病发病机制相关性研究进展

致谢

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