苦豆碱对野百合碱致大鼠肺动脉高压的保护作用

摘要

目的：
　　研究苦豆碱（Aloperine，ALO）对野百合碱致大鼠肺动脉高压的保护作用，并对Rho A/ROCK信号通路与其保护作用之间的关系进行探讨。
　　方法：
　　1.采用MPA心功能分析仪对肺动脉高压大鼠的mPAP和RVSP进行检测；
　　2.采用H.E.染色法分析对ALO对肺动脉高压大鼠肺小动脉病理结构变化的作用；
　　3.采用超声心动图对检测ALO对肺动脉高压大鼠血流加速时间的作用；
　　4.采用免疫组化染色法检测ALO对肺动脉高压大鼠肺动脉α-SMA和PCNA表达的影响；
　　5.采用Western blot方法检测ALO对肺动脉高压大鼠肺组织Rho A、ROCK1、ROCK2、t-MYPT1、p-MYPT1、p27kip1、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响，分析Rho A、ROCK1、ROCK2、t-MYPT1、p-MYPT1、p27kip1、Bax和Bcl-2对苦豆碱改善肺动脉高压作用的影响；
　　6.采用RT-qRCR方法检测ALO对肺动脉高压大鼠肺组织中Rho A、ROCK1、ROCK2 mRNA表达的影响，分析Rho A、ROCK1、ROCK2对ALO改善野百合碱致大鼠肺动脉高压作用的作用。
　　结果：
　　1.与正常组相比，模型组大鼠平均肺动脉压力（P<0.05）和右心室收缩压力（P<0.05）明显升高；与模型组比较，苦豆碱（25、50、100 mg/kg）组可以降低肺动脉高压大鼠平均肺动脉压力（P<0.05）、右心室收缩压力（P<0.05）。
　　2.H.E.染色结果显示，与模型组比较，苦豆碱（25、50、100 mg/kg）组可以减轻肺动脉高压后肺组织的病理结构改变，显著减低肺动脉血管壁厚度百分比（P<0.05）和血管壁面积百分比（P<0.05）。
　　3.超声心动图结果显示，与模型组比较，苦豆碱（50、100 mg/kg）组中血流加速时间明显降低（P<0.05）。
　　4.免疫组织化学染色结果显示，与模型组相比，苦豆碱（50、100 mg/kg）可以抑制肺动脉高压肺动脉中α-SMA（P<0.05）和PCNA（P<0.05）的表达。
　　5.Western blot结果显示，与正常组比较，模型组大鼠肺组织中Rho A(P<0.05)、ROCK1(P<0.05)、ROCK2(P<0.05)、Bcl-2(P<0.05)和p-MYPT1(P<0.05)的表达明显升高；与模型组比较，苦豆碱(100 mg/kg)能显著性抑制Rho A(P<0.05)、ROCK1(P<0.05)、ROCK2(P<0.05)、Bcl-2(P<0.05)和p-MYPT1(P<0.05)的表达，同时显著提高p27kip1(P<0.05)、Bax(P<0.05)的蛋白表达，但对t-MYPT1表达无影响。
　　6.RT-qPCR结果显示，与正常组比较，模型组大鼠肺组织中 RhoA(P<0.05)、ROCK1(P<0.05)和ROCK2(P<0.05)mRNA的表达明显升高；与模型组比较，苦豆碱(100 mg/kg)能显著降低Rho A(P<0.05)、ROCK1(P<0.05)、ROCK2(P<0.05) mRNA的表达。
　　结论：
　　1.ALO对野百合碱诱导的肺动脉高压具有保护作用。
　　2.ALO对野百合碱致大鼠肺动脉高压的保护作用与调节Rho A/ROCK信号通路表达有关。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

材料与方法

1. 材料

2 实验方法

结果

1. 苦豆碱对PH大鼠生存率的影响

2. 苦豆碱对PH大鼠超声心动图指标的影响

3. 苦豆碱对肺动脉高压大鼠血流动力学的影响

4. 苦豆碱对PH大鼠右心室肥大的影响

5.苦豆碱对肺动脉高压大鼠肺小动脉血管重构的影响

6. 苦豆碱对肺动脉高压大鼠肺小动脉α-SMA和PCNA表达的影响

7.苦豆碱对PH大鼠Rho A表达的影响

8.苦豆碱对PH大鼠ROCK1和ROCK2表达的影响

9.苦豆碱对PH大鼠肺组织p-MYPT1/MYPT1值的影响

10.苦豆碱对PH大鼠肺组织中Bcl-2，Bax蛋白表达的影响

11.苦豆碱PH大鼠肺组织中p27kip1蛋白表达的影响

讨论

1.MCT致PH大鼠模型的建立

2. 苦豆碱对PH大鼠肺动脉压的影响

3. 苦豆碱对PH大鼠右心室肥厚的影响

4. 苦豆碱对PH大鼠肺动脉重构的影响

5.超声心动图在本实验中的作用

6.阳性药在实验中的作用

7. 苦豆碱对PH大鼠肺组织中Rho A/ROCK信号通路表达及活化的调节作用

8.苦豆碱对MCT致PH大鼠肺组织中Rho A/ROCK信号通路下游因子Bcl-2， Bax和p27kip1表达的调节作用以及对PCNA表达的影响

结论

参考文献

文献综述:肺动脉高压病因机制及其治疗药物

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

攻读学位期间参与的基金项目

个人简历