基于TLR4/MyD88/NF-kB通路研究N-甲基野靛碱对小鼠溃疡性结肠炎的作用

摘要

目的观察N-甲基野靛碱（N-methylcytisine，NMC）对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护作用，并探讨N-甲基野靛碱对TLR4/MyD88/NF-kB通路的影响。 方法 小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠，连续7天诱导溃疡性结肠炎，并灌胃给予N-甲基野靛碱(1mg/kg、4mg/kg、16mg/kg) 7天，每天一次。 1. 以疾病活动指数、体重变化、结肠长度为观察指标，采用HE染色和测定髓过氧化物酶活性，观察N-甲基野靛碱对小鼠溃疡性结肠炎保护作用的影响。 2. 采用ELISA方法检测NMC对小鼠结肠组织中TNF-ɑ、IL-1β、IL-6表达的影响。 3 . 采用免疫组化法检测NMC对小鼠结肠组织中TLR4、NF-kB p65表达的影响。 4 . 采用Western blot方法检测NMC对小鼠结肠组织中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB、p-IκB、NF-κB p65、p-NF-κB p65和COX-2蛋白表达的影响。 5. 采用qPCR方法检测NMC对小鼠结肠组织中TLR4、MyD88 mRNA表达的影响。 结果 1. 与模型组比较，NMC（4mg/kg、16mg/kg）能降低小鼠的疾病活动指数、体重的减轻和结肠长度的缩短（P<0.05，P<0.01）；HE染色的结果显示，与模型组比较，NMC（4mg/kg、16mg/kg）能显著改善溃疡性结肠炎小鼠结肠组织病理损伤（P<0.05，P<0.01）。 2. 与模型比较，NMC（4mg/kg、16mg/kg）能降低溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中髓过氧化物酶的活性（P<0.05，P<0.01）。 3. ELISA结果显示，与模型组比较，NMC（16mg/kg）降低了溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中TNF-ɑ、IL-1β、IL-6的表达（P<0.05，P<0.01）。 4. 免疫组化结果显示，与模型组比较，NMC（16mg/kg）抑制了溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中TLR4、NF-kB p65的表达。 5. Western blot结果显示，与模型组比较，NMC（16mg/kg）显著抑制溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB、p-IκB、NF-κB p65、p-NF-κB p65和COX-2蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）。 6. qPCR结果显示，与模型组比较，NMC（16mg/kg）显著抑制溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中TLR4、MyD88 mRNA的表达（P<0.05）。 结论 NMC对葡糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有良好的保护作用，其保护作用机制可能与NMC抑制TLR4/MyD88/NF-kB信号通路有关。

目录

第一个书签之前

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

文献综述

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录

个人简介

开题、中期及学位论文答辩委员组成