NETs在癫痫患者癫痫发作后血浆、脑脊液中表达变化研究

摘要

目的：白细胞向脑内浸润引起炎症反应在癫痫的发生和发展过程中起着极其重要的作用。然而，癫痫发作后白细胞引起神经元损伤的具体机制尚不清楚。中性粒细胞胞外诱捕网（Neutrophil extracellular traps，NETs）是由中性粒细胞释放到胞外的包含有DNA、组蛋白、髓过氧化物酶等抗菌蛋白的纤维网状结构，在感染性疾病中扮演着重要的角色，并能加重神经元损害。本研究观察全面强直阵挛性发作（Generalized tonic-clonic seizures，GTCS）癫痫患者发作后，脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）和血浆（Plasma）中NETs（dsDNA、MPO）含量及血浆中S100B水平，并分析NETs与S100B的相关性，探讨NETs与血脑屏障通透性关系，为探索癫痫治疗的新靶点提供理论依据。
　　方法：选取2015年11月至2016年12月入住西安医学院第一附属医院神经内科的GTCS癫痫患者31例及紧张性头痛患者27例，并于发病24h内进行血浆、脑脊液标本的采集。采用 PicoGreen dsDNA Quantitation kits和酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）分别测定癫痫组与对照组血浆及脑脊液中NETs（dsDNA、MPO）和S100B含量，并分析二者之间的相关性。符合正态分布的计量资料用x± s表示，不符合正态分布的计量资料用M（QL，QU）表示，两组独立样本比较采用T检验（符合正态分布、方差齐的计量资料）和Mann-Whitney U检验（不符合正态分布、方差不齐的计量资料），两组相关数据间比较采用Wilcoxon带符号秩检验；性别构成比等分类变量资料采用2检验，数据相关性分析采用 Spearman秩相关系数检验。所有统计学分析中，0.05认为差异有统计学意义。
　　结果：癫痫组血浆、脑脊液中dsDNA的含量明显高于对照组（0.001；0.05），血浆、脑脊液中MPO的含量高于对照组（0.05）；癫痫组S100B水平明显高于对照组（0.05）；癫痫组脑脊液/血浆中dsDNA和MPO水平与血浆S100B含量均不具有相关性（>0.05）。
　　结论： GTCS癫痫患者发作后血浆和脑脊液中NETs（dsDNA、MPO）浓度均升高，说明NETs（dsDNA、MPO）可能参与了癫痫的发生与发展。GTCS癫痫患者血浆中S100B水平较对照组明显升高，证实了癫痫发作与血脑屏障破坏有关。GTCS癫痫患者脑脊液、血浆中NETs（dsDNA、MPO）含量与血浆S100B无相关性，提示NETs的形成与GTCS癫痫患者发作后血脑屏障破坏可能无关。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

材料和方法

1.研究对象

1.1病例分组

1.2纳入及排除标准

1.3临床资料观察与收集

2.主要仪器和试剂

2.1主要仪器

2.2主要试剂

3.1血浆/脑脊液 NETs（dsDNA）测定

3.2血浆/脑脊液中MPO、S100B测定

4.统计学分析

结果

1.一般资料

2. 癫痫组与对照组CSF/血浆NETs (dsDNA、MPO)及血浆S100B浓度测定

讨论

结论

附图

参考文献

文献:综述中性粒细胞胞外诱捕网在炎症相关疾病中的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文