卡巴胆碱对缺血再灌注损伤肠肌层Cajal间质细胞的影响及其机制的实验研究

摘要

目的：本研究分两部分：第一部分采用阻断肠系膜上动脉模型，观察小肠缺血再灌注(I/R)损伤时Cajal间质细胞形态学及肠道促炎症因子和氧自由基水平的变化。第二部分采用空肠袋模型给予拟胆碱药卡巴胆碱及其拮抗剂，观察其对I/R时Cajal间质细胞表达、促炎症因子及氧自由基水平的影响，探讨I/R损伤引起肠组织Cajal间质细胞形态变化的可能机制。 第一部分方法：成年雄性SD大鼠，随机分为手术对照(S)组、缺血再灌注损伤(I/R)组。制备肠I/R模型，I/R组复流30 min后肠袋内注射生理盐水，S组不阻断肠系膜上动脉仅注射生理盐水。于夹闭2.5h后处死动物，取肠袋组织进行HE染色、Cajal间质细胞免疫组化染色及电镜观察，并测定MDA、SOD、TNF-α、NO、iN-OS含量。 结果：正常小肠绒毛结构清晰、排列整齐，Cajal间质细胞主要分布在环纵肌层之间以及浆膜下区，细胞核椭圆、富含细胞器、并见细胞突起；I/R组小肠绒毛肿胀、结构紊乱、大量炎症细胞浸润，Cajal间质细胞表达量显著降低，细胞核形状不规则、异染色质趋边、细胞器结构紊乱、末梢突起破裂；MDA、TNF-α、NO含量及iNOS活性较S组显著升高、SOD活性显著降低(P＜0.05)。 第二部分方法：将大鼠随机分为I/R、I/R+CA组、I/R+CAR+M受体阻断剂(I/R+CAR+M)组、I/R+CAR+N受体阻断剂(I/R+CAR+N)组、S+卡巴胆碱(S+CAR)组，模型制作见第一部分。I/R+CAR+M组和I/R+CAR+N组分别于复流20 min后肠袋内注射M受体和N受体阻断剂，I/R+CAR、I/R+CAR+M、I/R+CAR+N组于复流30min后分别向肠袋内注射卡巴胆碱，S+CAR组不阻断肠系膜上动脉仅注射卡巴胆碱。于夹闭2.5h后处死动物，取肠袋组织测定MDA、TNF-α、NO含量及SOD、iNOS活性；另取肠袋组织进行HE染色及Cajal间质细胞免疫组化染色。 结果：I/R+CAR组小肠绒毛轻度充血水肿，有少量炎症细胞浸润，Cajal间质细胞表达量及超微结构较I/R组有所恢复，MDA、TNF-α、NO含量及iNOS活性与I/R组比较明显减少、SOD活性有所回升(P＜0.05)。给予N受体阻断剂后MDA含量与I/R组比较明显降低，SOD活性及Cajal间质细胞表达量有所回升(P＜0.05)，给予M受体阻断剂组炎症因子和氧自由基的生成均受到不同程度的抑制(P＜0.05)。 结论：1．缺血再灌注损伤时肠道Cajal间质细胞受损，出现数量减少、超微结构改变。2．肠缺血再灌注损伤时肠道释放大量炎症因子，氧自由基生成增加，卡巴胆碱兴奋M受体促进胃肠动力、扩张血管的作用及兴奋N受体的抗炎作用共同参与缺血再灌注损伤时对肠道的保护，有效减少炎症因子及氧自由基释放，从而减轻Cajal间质细胞的损伤。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一部分 肠I/R损伤时Cajal间质细胞形态学变化及促炎症因子、氧自由基水平的变化

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

第二部分 卡巴胆碱及其拮抗剂对I/R肠道Cajal间质细胞、促炎症因子及氧自由基水平的影响

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

4.小结

5.参考文献

文献综述 Cajal间质细胞与肠肌层炎症

附录(缩略语)

攻读学位期间发表文章情况

个人简历

致谢