玉米抗除草剂转基因植株再生和外源基因遗传稳定性分析

摘要

乙酰乳酸合成酶（acetolactate synthase,ALS）是分支氨基酸合成中的关键酶,也是磺酰脲类除草剂的作用位点.拟南芥（Arabidopsis thaliana）的als基因中特定碱基发生突变,使之对该类除草剂表现出抗性.该文采用基因枪轰击技术,将这一突变基因导入玉米细胞,得到再生的转基因植株,并对后代植株进行了遗传稳定性分析.

目录

符号说明

第一部分文献综述

1玉米遗传转化的研究

2抗磺酰脲类除草剂的分子生物学研究

3转基因植物中外源基因的遗传学研究

4转基因植物中外源基因沉默机理的研究

5本研究工作的目的和意义

第二部分材料与方法

1植物表达载体的构建

2玉米愈伤组织的转化和植株再生

3玉米丛生芽体系的建立及丛生芽组织块的转化

4转基因玉米植株的分子检测

5转基因植株的除草剂抗性测定

6转基因植株家系的建立和外源基因在后代中的稳定性分析

7外源基因在转基因植株中的拷贝数及位点数的分析

第三部分结果与分析

1质粒重组及其鉴定

2玉米胚性愈伤组织的转化

3玉米丛生芽组织块的转化

4转基因玉米T0代植株分析

5丛生芽来源的转化株系的T1代分析

6愈伤组织来源的5个转化株系后代分析和除草剂抗性检测

第四部分讨论

1玉米基因枪轰击转化

2转基因玉米中外源基因的整合与表达

3外源基因在转基因玉米后代中的遗传规律

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文